Reagente de Kovac
O reagente de Kovac é um reagente bioquímico consistindo de álcool isoamílico, para-dimetilaminobenzaldeído e ácido clorídrico concentrado. É utilizado para a análise diagnóstica chamada comumente de teste de indol, para determinar a capacidade do organismo para dividir indol a partir do aminoácido triptofano. O indol produzido gera um complexo vermelho com o n-dimetilaminobenzaldeído nas condições dadas.[1]
O mecanismo da reação do reagente de Kovac (science.pc.athabascau.ca).
Escherichia coli apresentando resultado positivo para o indol (reagente de Kovac torna-se vermelho)
e positivo para o sulfeto de hidrogênio (agar, meio SIM, não torna-se preto). [2]
Proteus mirabilis apresentando resultado negativo para indol (o reagente de Kovac não torna-se vermelho)
e positivo para o sulfeto de hidrogênio (agar, meio SIM, torna-se preto).[3]
Formulações
Do TheLabRat.com:[4]
Adicione 25ml de ácido cloridrico concentrado a 75ml de álcool amílico.
Dissolva 5 g de para-dimetilamino-benzaldeído na solução produzida no passo 1.
Separe alíquotas para frascos de utilização única (vials).
Armazene os vials fechados a 4oC.
Confirmado em www.fda.gov [5], com fonte original de Bacteriological Analytical Manual, 8th Edition, Revision A, 1998.
Variação, com planilha com diversas proporções de escala de produção:
Referências
1. Jvo Siegrist; Identification of Microorganisms Based on Color, Microbiology Focus Edition 1.4, Product Manager Microbiology
2. Escherichia coli in SIM Medium - faculty.ccbcmd.edu
3. Proteus mirabilis in SIM Medium - faculty.ccbcmd.edu
4. Kovacs' Reagent Recipe - TheLabRat.com
5. BAM R38: Kovacs' Reagent - www.fda.gov