Reagente de Kovac

O reagente de Kovac é um reagente bioquímico consistindo de álcool isoamílico, para-dimetilaminobenzaldeído e ácido clorídrico concentrado. É utilizado para a análise diagnóstica chamada comumente de teste de indol, para determinar a capacidade do organismo para dividir indol a partir do aminoácido triptofano. O indol produzido gera um complexo vermelho com o n-dimetilaminobenzaldeído nas condições dadas.[1]

O mecanismo da reação do reagente de Kovac (science.pc.athabascau.ca).

Escherichia coli apresentando resultado positivo para o indol (reagente de Kovac torna-se vermelho)

e positivo para o sulfeto de hidrogênio (agar, meio SIM, não torna-se preto). [2]

Proteus mirabilis apresentando resultado negativo para indol (o reagente de Kovac não torna-se vermelho)

e positivo para o sulfeto de hidrogênio (agar, meio SIM, torna-se preto).[3]

Formulações

Do TheLabRat.com:[4]

  1. Adicione 25ml de ácido cloridrico concentrado a 75ml de álcool amílico.

  2. Dissolva 5 g de para-dimetilamino-benzaldeído na solução produzida no passo 1.

  3. Separe alíquotas para frascos de utilização única (vials).

  4. Armazene os vials fechados a 4oC.

Confirmado em www.fda.gov [5], com fonte original de Bacteriological Analytical Manual, 8th Edition, Revision A, 1998.

Variação, com planilha com diversas proporções de escala de produção:

Referências

1. Jvo Siegrist; Identification of Microorganisms Based on Color, Microbiology Focus Edition 1.4, Product Manager Microbiology

2. Escherichia coli in SIM Medium - faculty.ccbcmd.edu

3. Proteus mirabilis in SIM Medium - faculty.ccbcmd.edu

4. Kovacs' Reagent Recipe - TheLabRat.com

5. BAM R38: Kovacs' Reagent - www.fda.gov