Studenti del triennio chimico/biotecnologico / chimico-alimentare
Classe: 3ª–4ª (livello: introduzione qualitativa alla spettrofotometria)
Al termine dell’attività gli studenti saranno in grado di:
Descrivere la funzione di uno spettrofotometro (sorgente → campione → rivelatore).
Spiegare la differenza tra intensità trasmessa, trasmittanza (T) e assorbanza (A).
Allestire un setup sperimentale low-cost con:
tubo di cartone
sorgente luminosa
cuvetta con soluzione colorata
fotocamera di uno smartphone come rivelatore.
Utilizzare il simulatore HTML5 per:
acquisire il bianco (I₀)
acquisire il campione (I)
calcolare T e A e interpretare qualitativamente i risultati.
Riconoscere i principali fattori di errore sperimentale (luce ambientale, posizione, stabilità della sorgente, esposizione della fotocamera).
Spettrofotometria: misura quanto una soluzione assorbe la luce a una certa lunghezza d’onda.
Percorso ottico: sorgente → campione in cuvetta → rivelatore (fotocamera).
Trasmettanza: T=II0T = \dfrac{I}{I_0}T=I0I
Assorbanza: A=−log10(T)A = -\log_{10}(T)A=−log10(T)
Legge di Lambert–Beer (solo qualitativo): più è concentrata la soluzione, più aumenta A e diminuisce T.
Per ogni postazione (gruppo di 2–3 studenti):
1 tubo di cartone (tipo tubo da carta da cucina o tubo più rigido).
1 sorgente luminosa:
lampada LED bianca piccola
oppure pannellino LED portatile.
1 cuvetta di plastica trasparente (o contenitore con pareti parallele, anche fai-da-te).
1 iPhone 11 (o altro smartphone con buona fotocamera).
Nastro adesivo (o colla a caldo) per fissare:
la lampada a una estremità del tubo
il telefono all’altra estremità.
Cartoncino nero o nastro isolante per oscurare il più possibile la luce laterale.
Solvente (es. acqua o acqua distillata) per il bianco.
Soluzioni colorate a concentrazioni diverse (es. colorante alimentare rosso/ blu/ verde con diluizioni: 1:10, 1:20, 1:40…).
PC / tablet con il simulatore HTML5 aperto (uno per gruppo o uno proiettato).
Preparazione del tubo
Prendi un tubo di cartone.
A circa metà lunghezza ritaglia una piccola finestra/fessura trasversale (rettangolare) dove entrerà la cuvetta.
Lato sorgente luminosa
Su una estremità del tubo, fissare la lampada LED o il pannello luminoso.
Assicurarsi che la luce entri dentro il tubo in modo diretto, possibilmente centrata.
Lato fotocamera
All’estremità opposta del tubo, posizionare l’iPhone in modo che la fotocamera posteriore guardi dentro il tubo.
Si può:
fissare il telefono con nastro (protetto),
oppure appoggiarlo su un supporto (treppiede, struttura LEGO, ecc.).
Il tubo dovrebbe aderire abbastanza al gruppo lenti per limitare la luce esterna.
Fessura per la cuvetta
Nella fessura centrale inserire la cuvetta: deve attraversare il tubo perpendicolarmente al fascio luminoso, proprio come in uno spettrofotometro reale.
Se necessario, fissare la cuvetta con un piccolo supporto in cartone o plastilina per mantenerla nella stessa posizione ad ogni misura.
Qui colleghi il setup fisico al simulatore che misura l’intensità.
Aprire sul PC/tablet il file HTML5 dello spettrofotometro che hai già creato.
Sullo smartphone:
impostare la luminosità dello schermo al massimo (serve per la comodità, ma non incide sull’esperimento).
aprire il browser che userà la fotocamera (se usi il simulatore direttamente sull’iPhone) oppure:
usare l’iPhone solo come camera e il simulatore sul PC collegato alla stessa fotocamera (se usi la camera del PC non serve questo passaggio).
Se usi l’iPhone direttamente con il simulatore HTML5:
assicurati che la pagina sia servita in HTTPS.
clicca su “Avvia fotocamera” nel simulatore.
Riempi la cuvetta solo con solvente (acqua distillata).
Inserisci la cuvetta nella fessura del tubo.
Accendi la lampada LED e verifica che la luce attraversi la cuvetta e arrivi alla fotocamera.
Sul simulatore:
controlla che l’immagine mostri il rettangolo (“posiziona qui la cuvetta”) centrato sulla parte illuminata della cuvetta.
premi il pulsante “Bianco (I₀)”.
Il simulatore calcolerà l’intensità media I₀ nel riquadro centrale.
Annota il valore in tabella.
Svuota la cuvetta e riempila con la prima soluzione colorata (ad es. colorante 1:10).
Reinserisci la cuvetta nella stessa identica posizione nella fessura del tubo.
Mantieni invariati:
stessa lampada
stessa distanza
stessa orientazione della cuvetta
stessa esposizione della fotocamera (se possibile blocca AE/AF sul punto centrale).
Sul simulatore premi “Campione (I)”.
Il simulatore mostrerà:
Intensità I
Trasmettanza T=I/I0T = I / I_0T=I/I0
Assorbanza A=−log10(T)A = -\log_{10}(T)A=−log10(T)
Ripeti il procedimento con soluzioni di concentrazione crescente (es. 1:20, 1:40, ecc.).