2025.12.25 液態培養羅伊氏乳桿菌L.reuteri (簡化至葡萄糖、提取物) 

上次的實驗後，思考了再簡化的可能，論文研究總歸是參考，但有點複雜了

這次將成分簡化的更單純，材料如下

葡萄糖：可用砂糖、二砂、黑糖、糖蜜替代

酵母提取物：可用啤酒酵母粉替代

甘油：這可加可不加

步驟：

  1.將葡萄糖、酵母提取物、甘油混合，放入壓力鍋滅菌15分鐘後等待自然冷卻

    沒有壓力鍋可以用電鍋蒸，內鍋1~2杯水，等到跳起來後自然冷卻亦可

  2.投入BioGaia Gastrus 0.5粒

  3.溫度控制38°C，恆溫培養

數據變化 (初始 → 15hr  → 26hr)

°Bx ： 4.8 → 0.3 → 0.7

 pH ： 6.11 → 3.49 → 3.37

可以看到培養液由當初的透明清澈狀態，到培養完成的混濁不透明狀態，這就是L.reuteri有在繁殖的表現

糖度(°Bx)的變化從0.3反而又上升至0.7，因用的是數位式糖度計，估計跟混濁度上升有影響

而混濁度提升有可能是因經過搖晃，或是菌數上升造成更混濁導致數值回升，但能看出糖有被利用完畢

經過5天沉降之後，去除上清液，分裝到凍菌管中，隔一段時間拿出來活化培養看看，看長期保存的活力減損

2025.12.29 用上面的培養液製做優格

2026.01.13 常溫液態培養羅伊氏乳桿菌L.reuteri

單純牛奶培養+菊粉培養，再國外的討論中出現以下問題

1..膠囊、藥錠、或菊粉都有機會帶有其他不同的雜菌存在，汙染風險高

  這點在加氏乳桿菌的培養也同樣要注意，可能只能透過快速降pH及培養基先完整滅菌來維持

2.羅伊氏乳桿菌利用菊糖的效率很差，基本上會先被雜菌利用，因此雜菌會繁殖的比羅伊氏更快更多

3.國外多次送驗發現牛奶製作的首批成品，羅伊氏乳桿菌的含量很低，且其它空氣落菌造成的各種雜菌含量佔95%，甚至驗不到羅伊氏乳桿菌

4.菊糖造成嚴重的不良反應

光基於以上幾點就是滿大的問題，若要這樣做不如直接吃膠囊，有多數反應吃膠囊效果更好

但也有不少人提出說吃優格也同樣有效果，但這些案例都未送驗，所以尚不知菌種是否多數為羅伊氏菌

羅伊氏菌素相關資訊

羅氏菌素的抗菌活性和用途

基本介紹

在醫藥領域，羅氏菌素是一種被廣泛研究和應用的抗生素。它屬於多肽類抗生素，具有廣譜抗菌活性，對許多細菌感染具有很好的療效。羅氏菌素最早由美國生物化學家斯皮珀曼和Waksman於1953年從土壤細菌產生的鏈黴菌（Streptomyces roseosporus）中分離出來。該物質是羅伊氏乳桿菌(Lactobacillus reuteri)、短乳桿菌(Lactobacillus brevis)、布氏乳桿菌(Lactobacillus buchneri)等在厭氧條件下分解甘油產生的一種廣譜抑菌物質，它對腸道病原體和腸道細菌具有廣譜抗菌特性。

A Natural Sterilant (Reuterin) Fermented from Glycerol Using Lactobacillus Reuteri: Fermentation Conditions

摘要

Reuterin是一種新發現的滅菌物質，對於gram-positive菌、gram-negative菌、酵母菌、黴菌及原蟲等皆有抑制作用。本研究分別探討了reuterin的生成及分離純化和reuterin生成的最適化發酵條件，包括了：發酵使用的菌量、發酵時間、發酵溫度和甘油起始濃度等。另外，我們也測試了reuterin對臨床上常感染的致病菌的最低抑菌濃度和最低滅菌濃度。實驗的對照組為臨床上生物組織材料最常使用的滅菌劑glutaraldehyde。實驗結果顯示，由高效能液相層析儀的分離純化可以得到高純度的reuterin，而reuterin生成的最適化發酵條件為配製含有Lactobacillus reutei 100 mg菌重/ml的300 mM甘油溶液，在37℃下反應1小時。另外，滅菌的結果顯示，reuterin所需的最低滅菌濃度要比glutaraldehyde低約2〜3倍。

羅伊氏菌素是羅伊氏乳桿菌在甘油無氧代謝過程中產生的廣譜（範圍廣泛）抗菌劑。

產品描述

羅伊氏菌素是羅伊氏乳桿菌在甘油無氧代謝過程中產生的廣譜（範圍廣泛）抗菌劑。羅伊氏菌是一種抗菌劑，可有效對抗革蘭氏陽性(Gram+) 和革蘭氏陰性(Gram-) 細菌以及酵母菌、黴菌和原生動物。羅伊特林對多種人類和家禽彎曲桿菌分離株具有有效的抗菌作用。