TP Mitose

Protocole

1.  Couper un segment terminal de racine à environ 5 mm de l'extrémité. On doit observer près de l'extrémité le méristème qui forme une petite tache. 

2. Avec une lame de rasoir, couper longitudinalement la racine en deux et placer ces fragments sur une lame de verre.

3.  Remarques : mettre deux ou trois racines par lame.

4.  Recouvrir les échantillons d'acide chlorhydrique à 1 mol/L (l'HCl détruit le ciment pectique qui relie les parois cellulaires, ce qui facilitera ensuite la dissociation des cellules).

5.  Laisser agir 2-3 min. (ne pas dépasser ce temps).

6.  Enlever ensuite l'acide avec un essuie-tout utilisé comme papier buvard en ayant soin de laisser en place l'échantillon végétal.

7.  Recouvrir l'échantillon d' une solution d'orcéine acétique et laisser agir pendant 10 min.

8. (l'orcéine colore principalement l’ADN et facilite donc leur repérage de l’état condensé de l’ADN).

9. Eliminer le colorant avec un essuie-tout en faisant attention de ne pas entraîner l'échantillon.

10. Recouvrir d'une goutte d'acide acétique à 45 % et poser une lamelle couvre objet.

11. Montrer votre préparation microscopique à l’enseignante afin qu’elle en évalue la qualité.

12.  Observer au microscope en commençant par le faible grossissement et repérer la zone méristématique (voir photo de gauche ci-après).

13.  Faire la mise au point sur des cellules en mitose (voir photo de droite ci-après)