Travaux Pratiques

Mise en évidence des biomolécules

Une biomolécule est une molécule présente naturellement dans un organisme vivant et qui participe à son métabolisme et à son entretien, par exemple les glucides, les lipides, les protéines, l'eau et les acides nucléiques.

Objectif : Mettre en évidence les principales biomolécules par des tests simples

Modalités : manipulation par binôme

Matériel :

· Matériel par poste : porte tubes, tubes à essais, pinces, pro pipette, pipettes, compte-gouttes, verre de montre

· Produits réactifs : Liqueur de Fheling, lugol (eau iodée), soude, sulfate de cuivre, eau distillée

· Produits à tester : glucose, empois d’amidon, albumine, huile

· Autre : feuille de papier, bain marie

Travail à faire : Réaliser les manipulations présentées dans les protocoles

Travail à rendre : Compléter le tableau ci-joint en annexe avec vos résultats sous forme de croquis en couleur.

Sécurité :

· Utiliser une seule pipette ou compte-goutte par réactif

· Ne jamais pipetter à la bouche

· Utiliser les pinces et les lunettes pour les réactions, notamment au bain marie

Protocole

1/ Mise en évidence des sucres réducteurs par la liqueur de Fehling à chaud

· Principe de la réaction :

Le complexe oxyde cuivrique-acide tartrique est soluble en milieu basique et il est bleu. L'ion cuivrique (Cu2+) est réduit en ion cuivreux (Cu+) par la fonction aldéhyde (-C=O) des sucres réducteurs pour donner l'oxyde cuivreux (Cu2O) qui est rouge et qui précipite.

Exemple pour le glucose :

Glucose réduit + Cu2+ ---------> glucose oxydé + 2 Cu+

En milieu alcalin : 2 Cu+ + 2 OH- ---------> 2 CuOH ---------> H2O + Cu2O

Cu2O précipite avec une coloration rouge brique.

· Manipulation :

o Tube temoin : 1cm Liqueur de fehling seule+2cm d’eau distillée

o Tube à tester : 1cm Liqueur de fehling +2cm de solution de glucose

Mettre au bain marie 50° pendant 10 minutes

Réaliser un schéma de votre expérience dans le tableau joint en annexe

2/Mise en évidence des protéines par la réaction de biuret

· Principe de la réaction : La réaction du biuret est une réaction mettant en évidence les liaisons peptidiques.

La méthode consiste à mettre en milieu basique des ions cuivre (II) en présence de protéines. Un complexe coloré mauve ou violet se forme en effet lorsque les ions Cu2+ sont complexés par des liaisons peptidiques de la protéine.

· Manipulation :

On prélève quelques gouttes de solution de biuret (15 gouttes de sulfate de cuivre +15 gouttes de soude) dans chaque tube à essai

o Tube témoin : rajouter un cm d’eau distillée

o Tube à tester : rajouter 1cm de solution d’albumine

Schématiser vos résultats dans le tableau joint en annexe

3 / Mise en évidence des sucres complexes par l’eau iodée ( Lugol)

· Principe : L'amylose est une grande chaîne polymérique de glucose. Elle n'a pas de ramification. Cette chaîne n'est pas droite, elle s'enroule en spirale à cause des liaisons hydrogène. Le diiode, qui compose l'eau iodée, est composé de molécules I₂. - la molécule de diiode va s’insérer dans l'hélice, - il y a couleur bleue quand il y a trois molécules de diiode fixés à la suite. On obtient d'autres couleurs selon la longueur de la chaine : jaune-pâle ou rouge (dextrine), brun acajou (glycogène) et bien sûr bleu (amylose et cellulose en présence)

· Manipulation :

o Témoin : mettre un cm d’eau distillée +5 gouttes d’eau iodée

o Tube a tester : Mettre un cm d’empois d’amidon+ 5gouttes d’eau iodée

Schématiser vos résultats dans le tableau joint en annexe

4 / Mise en évidence des lipides par tache translucide sur papier

Principe : les corps gras laissent une trace translucide même après séchage sur une feuille de papier visible par transparence face à une source lumineuse

· Manipulation :

o Témoin : déposer une goutte d’eau distillée sur une feuille de papier et la faire sécher, observer par transparence.

o A tester : déposer une goutte d’huile sur une feuille de papier et la faire sécher, observer par transparence.

Schématiser vos résultats dans le tableau joint en annexe