TP L'activité de l'amylase

Digestion de l’amidon par l’amylase salivaire

Objectif : Découvrir le mode d’action d’une enzyme hydrolysante : l’amylase

Définition : une enzyme est une protéine qui facilite les réactions chimiques sans participer ni aux réactifs, ni aux produits

Préparation :

Solution d’empois d’amidon à 5%

Solution d’amylase salivaire :

- Quelques millilitres Salive diluée deux fois d’un des deux binômes

o Il est important de noter que seule la personne ayant salivée manipule sa propre salive.

Matériel par binôme :

- Un bain-marie

- Un portoir avec 4 tubes

- Eau distillée (pour les témoins négatifs)

- Plaques de coloration

- Eau iodée

- Liqueur de Féhling

- Une réserve de chacune des 2 solutions

- Pipettes

- Un stylo feutre

- Un chronomètre

Protocole :

- Dans le tube 1 verser 10mL d’empois d’amidon et 2 mL de solution d’amylase salivaire. Agiter.

- Dans le tube 2 verser 10mL d’eau distillée et 2 mL de solution d’amylase salivaire. Agiter.

- Identifier a l’aide d’un feutre chaque compte goutte « 1 » et « 2 » que vous aller utiliser à chaque prélèvement.

1. Mise en évidence d’amidon par l’eau iodée :

o Déposer dans les puits de plaque à coloration une goutte d’eau iodée

o Prélever immédiatement et déposer dans 2 puits quelques gouttes de chaque tube en ayant soin pour faire le temps 0 ( noter a coté du puit t =0)

o Incuber les tubes au bain-marie à 37°C

o Prélever quelques gouttes toutes les 20 secondes pour faire le test pendant 1 minute

o Noter vos résultats

2. Mise en évidence des sucres réducteurs par la, liqueur de Fehling

o Déposer quelques gouttes sur les bandelettes « glucotest »

o Faire le test à la liqueur de Fehling à chaud

o Noter vos résultats

Réaliser un compte rendu de TP en faisant apparaître clairement vos résultats, vos interprétations et le cas échéant vos hypothèses.