TP TEST ELISA 

Martha qui va avoir 75 ans a décidé de se faire vacciner contre la Covid-19 afin de pouvoir organiser son anniversaire et revoir ses proches et notamment son petit fils Kevin. Les dernières injections ont eu lieu depuis 15 jours, elle voudrait être sûre qu’elle ne risque pas de se faire contaminer par son petit-fils qui est cas contact depuis 1 semaine. Elle décide donc sur les conseils de de son médecin de faire un test sérologique. Vous avez la charge de faire ce test et de conseiller Martha et Kevin pour leur permettre de se revoir et de fêter dignement son anniversaire.  

Vous avez la charge de faire ce test et de conseiller Martha et Kevin pour leur permettre de se revoir et de fêter dignement l’anniversaire des 75 ans ! a ce titre vous serez amenés à expliquer les résultats du test à Martha lui expliquer le sprincipe de la vaccination et de conseiller Kevin sur la démarche à suivre pour pouvoir rencontre sa grand-mère dans les meilleures conditions sanitaires ( test à réaliser et gestes de protection à mettre en œuvre) 

Principe du test : 

Le test E.L.I.S.A. (Enzym Linked ImmunoSorbent Assay) est un test immunologique de détection de protéines. Il  est utilisé pour la détection et le dosage d’antigène ou d’anticorps. 

Note : Le dosage de protéines par ELISA concerne généralement les antigènes. Pour les anticorps, étant donné l'hétérogénéité de la réponse anticorps, on parle plutôt de titrage. 

Dans le test choisi ici on va mettre en évidence la présence d’un anticorps. 

Cet anticorps va se fixer spécifiquement sur des antigènes tapissant un support et sera révélé par un second Ac qui va être couplé à  un marqueur. 

Le marqueur ici est une enzyme qui va induire la coloration d’un substrat par oxydation. 

 On aura donc  

-Une solution d’Antigène 

-Une solution d’Ac spécifique de l’Ag 

-Une solution d’Ac anti-Ac couplé à une enzyme 

-Une solution de substrat de l’enzyme 

Matériel à disposition  

• Sérum du patient à tester S ? 

• Serum temoin négatif ( S-) 

• Serum temoin positif ( AC1) 

• Barette de puits au fond desquels sont fixés des antigènes viraux 

• Anticorps AC2 couplés à une enzyme ; Ils reconnaissanet les anticorps fixés aux antigènes viraux 

• Tampon PBS ( solution de lavage) 

• Substart de l’enzyme ( qui tedetecte cette dernière par l’apparition d’une coloration 

• Micropiperttes 

• Gants , chronomètre, ppaier filtre, marqueur