HaloTag染色
- HaloTag発現細胞を用意する
- HaloTag-TMRリガンドを培養液で1000倍に希釈する
- 35 mmガラス底ディッシュなら0.2 uL HaloTag-TMRリガンド + 200 uL 培地
- 細胞の培地を吸引し、希釈したリガンド液を加える
- 37度で15分間CO2インキュベーターでインキュベーションする
- リガンドを含んだ培地をアスピレーターで除き、PBSで3回(大事)洗浄する
- (大事)普通の培地(DMEM+10%FBS)を加えてさらに30分間培養して、細胞内のリガンドを除く
- イメージング用の培地(FluoroBrite, 0.2% FBS, Glutamax など)に交換して観察。