Hemostasia
HEMOSTASIA PRIMARIA
Grupo 4
Marina Gonzalez Picarzo, Andrea Lozano, Irene Macías, Lara Merino,Marta Pintado, Lucia Sánchez
Docente: Mercedes Pumariño Almoril
PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA PRUEBAS DE HEMOSTASIA:PLASMA POBRE EN PLAQUETAS (PPP) Y PLASMA RICO EN PLAQUETAS (PRP)
INTRODUCCIÓN
La hemostasia es un proceso que consiste en la detección de hemorragia producida tras una lesión vascular. Para evaluar la función de la hemostasia, se realizan diversas pruebas utilizando muestras de sangre. Dos tipos de muestras comúnmente utilizadas son el Plasma Pobre en Plaquetas (PPP) y el Plasma Rico en Plaquetas (PRP).
OBJETIVOS
Separación y obtención de componentes de la sangre mediante técnicas de centrifugación.
Obtención de Plasma Rico en Plaquetas (PRP) y Plasma Pobre en Plaquetas (PPP).
Familiarizarse con técnicas de laboratorio, como el uso de la centrífuga y la manipulación de muestras.
MATERIALES
Eppendorf.
Centrífuga.
Parafilm .
MODUS OPERANDI
En primer lugar, se deposita una cantidad de 5 ml de sangre destinada al Plasma Rico en Plaquetas (PRP) y otros 5 ml para el Plasma Pobre en Plaquetas (PPP) en Eppendorf separados.
A continuación, se introduce en la centrífuga de manera equilibrada junto con otra muestra de igual volumen. El proceso de centrifugación se lleva a cabo a una velocidad de entre 2500 y 3000 rpm durante 10 minutos para la obtención del PPP, y a una velocidad de entre 500 y 1000 rpm durante 3 a 5 minutos para la obtención del PRP.
Posteriormente, se retira el tubo de ensayo de la centrífuga con sumo cuidado, evitando cualquier posible contaminación entre las diferentes fases.
RESULTADOS
Después de seguir el procedimiento para pruebas de hemostasia y obtener Plasma Pobre en Plaquetas (PPP), se observa lo siguiente:
En la primera centrifugación, vemos que el plasma no se distingue del resto pero tras varios intentos se ha obtenido un plasma claro y transparente. Esto indica que las plaquetas han sedimentado junto con los otros elementos formes de la sangre, dejando el plasma libre de plaquetas.
En la parte inferior, se observa un sedimento de plaquetas que se ha separado del plasma. Este sedimento aparece como una capa delgada de color blanco o beige.
Al extraer el plasma pobre en plaquetas con la pipeta Pasteur se observa que la muestra no contiene una concentración significativa de plaquetas en comparación con el plasma convencional.
Tras seguir el procedimiento para las pruebas de hemostasia y obtener Plasma Rico en Plaquetas (PRP), se observa lo siguiente:
El proceso de centrifugación ha separado los componentes de la sangre, dejando un plasma turbio. Este tipo de plasma no sedimenta las plaquetas, lo que significa que estas quedan suspendidas en la muestra.
Al extraer el PRP con una pipeta Pasteur, se observa que la muestra contiene una alta concentración de plaquetas en comparación con el plasma convencional. Las plaquetas aparecen como pequeñas partículas en la muestra.
CONCLUSIÓN
En conclusión tras seguir el procedimiento adecuadamente se ha obtenido un plasma claro y transparente que indica que las plaquetas han sedimentado junto con otros elementos formes de la sangre, dejando el plasma libre de plaquetas.
En cambio el plasma PRP es turbio lo que indica que las plaquetas no han sedimentado y han quedado suspendidas en la muestra.
LA TÉCNICA DE IVY
INTRODUCCIÓN
El tiempo de hemorragia o de sangría (TS) es el tiempo que transcurre desde la
sección de un grupo de capilares hasta la formación del trombo blanco plaquetario. El tiempo de hemorragia se determina efectuando una pequeña herida en la piel, y seguidamente midiendo el tiempo que tarda en cesar la sangre a través de la herida.
Muestra biológica: sangre completa
OBJETIVOS
Con esta técnica se busca la importancia del tiempo que tardan los vasos sanguíneos en detener el sangrado de una herida.
MATERIALES
-Esfigmomanómetro
-Cronómetro
-Lanceta
-Papel
MODUS OPERANDI
Colocar un esfigmomanómetro alrededor del brazo del paciente e inflarlo a 40 mmHg.Esta presión se mantiene durante toda la prueba.
Seleccionar una región dorsal del antebrazo en la que se va a practicar la incisión y desinfectarla. Se deben evitar venas superficiales, cicatrices y hematomas.
Colocar el dispositivo automático sobre la piel del brazo sin presionar y apretar el disparador. Al mismo tiempo poner en marcha el cronómetro. La incisión se realiza en dirección paralela a la longitud del brazo. También se puede hacer con una lanceta.
Recoger con un papel del filtro cada 30 segundos la gota de sangre que esté presente en el antebrazo, para hacer esto no se debe tocar la herida con el papel de filtro para evitar que se rompa el trombo plaquetario que se está formando.
.Detener el cronómetro cuando cese el sangrado.
RESULTADOS
El resultado de esta prueba es inferior a los 5 minutos.
CONCLUSIONES
Se ha realizado la prueba correctamente, y además podemos observar que el tiempo en que tarda en cerrarse la herida es el adecuado , porque es inferior a los 5 minutos. Si hubiera estado por encima de los 5 minutos estaríamos hablando de alguna anomalía.
MÉTODO DE DUKE
INTRODUCCIÓN
Cuando existe una lesión vascular, por reflejo nervioso y espasmo muscular del vaso, sobreviene una contracción del mismo, fenómeno que dura segundos y tiene como finalidad
lograr la estasis de la circulación favorece la formación del tapón plaquetario. En lesiones de capilares, esta vasoconstricción, refleja es suficiente para permitir la adhesión y plaquetaria
hemorragia la detención la hemorragia. El tapón hemostático plaquetario primario es una masa de plaquetas que se acumulan en el punto lesionado de la pared vascular, como resultado de su adherencia, al colágeno del tejido subendotelial que ha quedado expuesto (adhesión) y luego entre sí (cohesión y agregación). Los tapones primarios son inestables y fácilmente eliminados. Un tiempo de sangrado normal indica una retracción normal de los capilares y la existencia de un número suficiente de plaquetas, con actividad normal.
OBJETIVOS
Con esta técnica se busca la importancia del tiempo que tardan los vasos sanguíneos en detener el sangrado de una herida.
MATERIALES
Torunda
Desinfectante
Lanceta
Cronómetro
MODUS OPERANDI
Desinfectar el dedo con alcohol
Apretar el dedo.
Pinchar el dedo en la yema por un lateral.
Poner el cronómetro.
Dejar que salga la sangre.
Retirar la sangre poco a poco sin presionar la incisión.
Contar el tiempo de sangrado.
RESULTADOS
El tiempo es inferior a 5 minutos.
CONCLUSIONES
Se ha realizado la prueba correctamente y además, podemos observar que la compañera tiene un tiempo de sangría adecuado ya que, el resultado es de 48 '84 segundos y podemos decir que está dentro de los valores normales. El tiempo de sangría establecido como normal es de 5 min, por encima estaríamos ante una anomalía.
FRAGILIDAD VASCULAR (PRUEBA DE RUMPEL-LEEDE)
INTRODUCCIÓN
La prueba de RUMPEL-LEEDE o del torniquete evalúa la resistencia de las paredes capilares ante un aumento de presión intravascular con anoxia.
OBJETIVOS
Determinar la fragilidad de las paredes capilares.
Estimar la tendencia de la hemorragia, mediante la observación de la piel.
MATERIALES
Esfigmomanómetro.
Rotulador.
Tensiómetro.
Cronómetro.
MODUS OPERANDI
Medir la presión arterial máxima y mínima y calcular la media aritmética
Dibujar un círculo de unos 5 cm de diámetro, en la cara anterior del antebrazo.
Poner el manguito del esfigmomanómetro en el brazo e hinchar hasta alcanzar la presión media calculada anteriormente.
Mantener esa presión 5 minutos
Aflojar y retirar el manguito.
Cuenta el número de petequias que han aparecido en el círculo dibujado.
RESULTADOS
Tras la realización de la técnica se ha obtenido un resultado negativo dado que no se han observado petequias dentro del rectángulo trazado en el brazo.
CONCLUSIONES
Esto significa que no se han producido extravasaciones sanguíneas visibles en forma de petequias, lo que sugiere una buena resistencia de las paredes capilares ante el aumento de la presión intracapilar y la anoxia. Este resultado es favorable y puede indicar una adecuada salud vascular.
RETRACCIÓN DEL COÁGULO
INTRODUCCIÓN
El tapón hemostático de plaquetas que se forma como resultado de la hemostasia primaria, crece hasta que consigue cerrar la abertura en el vaso. Durante este tiempo, las plaquetas del tapón metabolizan glucosa y producen atp de la energía este inicia la contracción de una proteína de las plaquetas parecida a la actina miosina llamada trombostenina que es la causante de la retracción del coágulo. Esta retracción ocurre una vez estabilizado el coágulo, por contracción de las proteínas fibrilares del citoesqueleto plaquetario, de las glicoproteínas receptoras de membrana de la propia fibrina, el coágulo que se retrae queda firmemente adherido a la pared vascular. Al contraerse el coágulo los hilos de fibrina se contraen gradualmente y expulsan el plasma del coágulo, aunque se retienen eritrocitos, plaquetas y otros elementos sólidos. El plasma expulsado del coágulo tiene poco o nada de fibrinógeno porque se ha convertido en fibrina y se llama suero. Para que ocurra retracción máxima del coágulo, la sangre debe poseer número adecuado de plaquetas.
Consiste en evaluar la capacidad de retracción del coágulo, ya que éste depende de la aptitud de las plaquetas para realizar una contracción de fibras de trombostenina intraplaquetarias. Ofrece una información directa sobre las plaquetas, ya que medimos la cantidad de suero que se genera al retraer el coágulo.
OBJETIVOS
Justificar la utilidad de la prueba de retracción del coágulo.
Ejecutar la prueba correctamente.
MATERIALES
Tubo de sangre sin anticoagulante
Tubo de ensayo
Alambre
Regla de medir
MODUS OPERANDI
Introducir 1 ml de sangre sin anticoagular en un tubo de ensayo de vidrio limpio (75 mm x 10 mm)
Medir la distancia desde la base del tubo hasta el menisco de la sangre (altura total).
Colocarlo en un baño durante 1 hora.
Retirar con cuidado el coágulo con un palillo fino o un alambre, dejando el suero que ha rezumado del tubo.
Medir la distancia desde la base del tubo hasta el menisco del suero (altura del suero).
Calcular el porcentaje que representa la altura del suero respecto al total.
RESULTADOS
Paciente 1: 2.5cm ( 2,5/6)x 100=41,66 supera el 40% (valor normal)
Paciente 2: 4cm ( 4/6)x 100=66,67 supera el 40% (valor normal)
Paciente 3: 2 cm ( 2/6)x 100=33,33 es inferior al 40% y debería ser igual o superior
Paciente 4: 5.8cm ( 5,8/6)x 100=96,66 supera el 40% (valor normal)
Medimos la altura del suero que son 2,53 y la altura total, sumando la altura del suero con la del coágulo. Después, se divide la altura del suero entre la del coágulo y se multiplica por 100 para calcular el porcentaje.
Como el resultado es 45% se encuentra dentro de la normalidad.
CONCLUSIONES
En conclusión, se ha seguido el procedimiento correctamente lo que ha permitido la formación de coágulos y la separación del suero. Al retirar con cuidado el coágulo, se observó la presencia de suero en el tubo.
Los resultados obtenidos al medir la altura del suero en relación con la altura total mostraron que los pacientes 1, 2 y 4 presentaron porcentajes superiores al 40%, lo que se considera dentro de los valores normales.
Sin embargo, el paciente 3 mostró un porcentaje inferior al 40%, lo que sugiere una posible anormalidad en la coagulación o en la separación del suero.