Excelência em Engenharia Biológica

Nosso modelo definitivo compreende tcu-1, um promotor sensível ao cobre, como o regulador da expressão de sulfeto quinona redutase (SQR), sulfito redutase (CysI) e repressor de tetraciclina (tetR). Na outra extremidade, o promotor mínimo do citomegalovírus (miniCMV_Pro) regula a expressão da lacase, que também é dependente de operadores de tetraciclina (tetO2) que podem impedir sua transcrição.

No início, a alta concentração de cobre do chorume irá reprimir a atividade tcu-1 e, consequentemente, a transcrição de SQR, CysI e tetR; ao passo que o gene da lacase será expresso normalmente. A tradução da lacase eventualmente diminuirá a concentração de cobre do meio, devido à incorporação do metal em sua estrutura. O sistema acabará atingindo um ponto em que a concentração de Cu será baixa o suficiente para que tcu-1 seja ativado, o que, por sua vez, promoverá a expressão das enzimas redutoras de enxofre, assim como o tetR. Após a expressão, o tetR se liga ao tetO2 e impede a transcrição da lacase.

Nosso objetivo é regular rigidamente ambas as estratégias de biorremediação, de forma que a degradação dos compostos poliaromáticos e polifenólicos ocorra antes do metabolismo dos compostos de enxofre que contribuem para o odor do lixiviado. Em termos de engenharia genética, adicionamos braços de homologia a cada plasmídeo para que todo o material genético fosse incorporado ao genoma do fungo. Marcadores de seleção também foram adicionados para identificar e selecionar adequadamente fungos transformados no futuro.