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詹前聖
實驗步驟
實驗步驟
1.下膠製作
1.下膠製作
所需材料:
1.H2O
2.29%Acry Mix(膠體基本單位)
3.1.5M Tris (PH8.8)(維持電中性)
4.10% SDS(清潔劑的一種)
5.TCE(膠體染色)
6.10% APS(提供自由基)
7.TEMED(催化劑)
2.上膠製作
2.上膠製作
H₂O
29% Acrylamide Mix
1.5 M Tris (pH 8.8)
10% SDS
TEMED
10% APS
將上膠小心注入下膠上後插入齒梳(提供放入蛋白質式樣的空間)
(圖為注入上膠前)
2.5 其實我們上膠失敗了
2.5 其實我們上膠失敗了
到底為什麼?其實我們也不知道
到底為什麼?其實我們也不知道
但在經過助教們的幫助後(重新做了兩次)
才終於讓我們的上膠凝固了
可喜可賀
3.進行PCR實驗(跑膠)
3.進行PCR實驗(跑膠)
加入適量的Buffer
將蛋白質式樣配置dye
注入齒梳刻出的空間
開始跑膠
4.成果處理
4.成果處理
1.將雙層玻璃片取出，在水槽中利用鏟子將玻璃片分開(須一直沖水操作)
2.使用鏟子分離玻璃與膠體(還是要沖水)
3.將上膠用鏟子切除丟棄，下膠置入裝有水的塑膠盒中
4.將塑膠盒連同下膠拿去UV室檢驗
5.結果發表
5.結果發表
沒錯 我們失敗了
全部的組別都是
經過分析及討論
能夠確定是因為蛋白質的濃度不夠，導致PCR的效果不明顯
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