• 研究動機

欲了解如何利用物理方法與化學藥劑，控制細菌的生長；以及外在的環境如培養知溫度、紫外光以及含氧量等，對細菌的生長是否有影響。

• 實驗原理

(一) 溫度

微生物生長的溫度從-5到80℃ 都有，範圍很廣，然而不同微生物適合的溫度有差別；每種只能生長在一定的範圍內，主要原因是溫度會影響其體內酵素活性。

(二) 紫外光

不同於行光合作用的細菌及藻類，微生物的生長並不需要日光，有時甚至是一種傷害。日光中的紫外光會對大部分的微生物造成傷害；而265nm是微生物DNA最易吸收的波長。吸收了此波長的紫外光，會改變微生物遺傳訊息的傳遞和突變速度，並產生雙嘧啶聚合物；此一產物能吸收紫外線和相鄰能接的能量，干擾DNA分子的正常功能和複製作用，並進而導致微生物死亡。由此可知，紫外光具有殺死微生物細胞的功能。

(三) 含氧量

微生物生長所需的氣體主藥包括氧氣及二氧化碳，不同種類所需之氧氣量也不同。

(四) 化學物質

許多化學物質會影響細菌的生長，甚至破壞細菌結構或干擾其代謝反應。本實驗利用抗生素感受性實驗，以測定細菌對抗生素的感受程度，方能選出適當且有效的抗生素。

• 實驗方法與步驟

(一) 紫外光照射實驗

1. 準備大腸桿菌的稀釋菌液，取兩個LB培養基
2. 取出菌液0.1ml，均勻分散於LB培養基上(塗抹法)
3. 將塗好菌之LB培養基至於無菌操作台之紫外光下，並將蓋子打開
4. 以紫外光照射，分別作用5及20分鐘，對照組則不照射紫外光(實驗一之塗抹法菌盤當對照組)
5. 將各菌盤到放置於37度C培養，隔天觀察並計算菌落數，討論紫外光對細菌生長的影響

(二)化學物質感受性實驗

1. 大腸桿菌之未稀釋菌液一管
2. 將一個LB培養基以簽字筆分別標示不同化學藥劑
3. 自培養液中吸取0.1ml菌液，以三角波棒均勻塗抹於LB培養基
4. 將鑷子過火，夾取Ampicillin圓型濾紙直接貼上培養基
5. 將鑷子過火，再夾取四片無菌圓形濾紙，貼至培養基，再分別加入15微升待測物及無菌水
6. 將菌盤正放，至於37度C隔夜培養後，觀察抑菌情形並紀錄之

• 實驗心得

從實驗結果我們驚訝地發現，漱口水和無菌水竟無明顯抑菌效果，反而是生活中常見的蒜頭萃取出的液體，有直徑13mm的抑菌圈！做了這幾個接連的大腸桿菌實驗，讓我們知道光是0.1ml的菌液就能產生10的好幾次方個菌，也讓我們更加注重「吃飯前一定要洗手」的好習慣。