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进入词条全站搜索国际版帮助首页秒懂百科特色百科知识专题加入百科百科团队权威合作个人中心基因编辑播报讨论上传视频通过基因编辑技术对生物体基因组特定目标进行修饰的过程订阅0有用+10本词条由中国科学院微生物研究所、海军军医大学 参与编辑并审核，经科普中国·科学百科认证 。基因编辑（Gene Editing）是指通过基因编辑技术对生物体基因组特定目标进行修饰的过程。高效而精准的实现基因插入、缺失或替换，从而改变其遗传信息和表现型特征。2024年7月8日，《人类基因组编辑研究伦理指引》发布。 [15]中文名基因编辑外文名Gene Editing [16]所属类别生物科技应用技术CRISPR/Cas9外文缩写GE [16]目录1简介2技术原理▪技术锌指核酸酶技术（ZFN）▪转录激活样效应因子核酸酶技术▪成簇规律间隔短回文重复序列-相关核酸酶3技术应用▪遗传疾病治疗▪癌症治疗▪农作物改良▪遗传调控研究4生物能源生产5技术突破6未来发展7风险和争议8典型事件9法律规定10相关文件简介播报编辑基因编辑（Gene Editing）是指通过基因编辑技术对生物体基因组特定目标进行修饰的过程。高效而精准的实现基因插入、缺失或替换，从而改变其遗传信息和表现型特征。基因编辑技术是一种革命性的生物技术，用于修改生物体的基因组。它基于多种工具，使科学家能够针对特定的基因序列进行精确的编辑和改变。基因编辑过程：在基因组中特定位置产生位点特异性双链断裂（DSB），通过非同源末端连接（NHEJ）或同源重组（HR）来修复DSB，同时完成基因编辑。基因编辑技术具有巨大的潜力，可以在医学、农业和其他领域产生革命性的影响。然而，这项技术需要仔细权衡伦理和安全，并加强监管措施，以确保其安全性和可持续性。技术原理播报编辑同源重组技术（homologous recombination，HR）是较早使用的基因编辑技术，其原理是将外源性目的基因导入受体细胞，通过同源序列交换，使外源性DNA片段取代原位点上的基因，从而达到使特定基因失活或修复缺陷基因的目的。由于效率极低，且出错率高，因此其应用受到了一定的限制。20世纪80年代末、90年代初，人们发现通过在特定的基因组靶点诱导双链断裂(double-stranded break，DSB)能在染色体水平上实现高效和准确的基因修饰。DSB被诱导后，细胞内将启动两种主要的修复机制：非同源末端连接（nonhomologous end joining，NHEJ）和同源重组（homology directed repair，HDR）。NHEJ不依赖模板直接连接DNA两端，可以在DSB位点有效产生不同长度片段的插入或缺失，通常导致基因功能失活，快速但不精确；HDR依赖于模板进行定向修复，可以实现特定位点的精确插入、缺失或者碱基置换，更精确。此后，科学家便专注于开发各种基于核酸内切酶机制的基因编辑技术，以实现对特定基因组位点DSB的精确诱导。技术锌指核酸酶技术（ZFN）技术锌指核酸酶技术（ZFN） [1]。背景：1984年，科学家在非洲爪蟾的转录因子中发现锌指蛋白，经过人工改造并与核酸内切酶连接，发展成锌指核酸酶技术（Zinc Finger Nuclease, ZFN）。结构：锌指核酸酶由两个部分组成：锌指蛋白（Zinc Finger Protein, ZFP）和Fok1核酸内切酶。锌指蛋白是由多个锌指结构串联而成，用于识别和结合特定的基因序列。Fok1核酸内切酶具有特异性的切割能力，通过二聚化形成一个有效的切割复合物，可以切割真核基因组中的任何特定识别序列。锌指蛋白中的DNA识别域由一系列Cys2-His2锌指结构组成（通常为3-4个），每个锌指结构识别并结合特定的三个碱基。工作原理：多个锌指蛋白结构串联形成一个锌指蛋白组，能够识别特定的碱基序列，具有高度的特异性。非特异性核酸内切酶来自Fok1，它位于C端，由96个氨基酸残基组成切割域。Fok1是一种来自海床黄杆菌的限制性内切酶，只有在二聚体状态下才具有切割活性。每个Fok1单体与一个锌指蛋白组相连形成一个ZFN，它们识别特定的位点，当两个识别位点之间的距离适当（6-8个碱基）时，两个ZFN单体相互作用形成切割功能，实现DNA的定点切割。优势：能够在指定的位点引发DNA双链断裂，促使细胞启动自然的DNA修复过程，包括同源重组和非同源末端连接，从而诱导位点特异性的基因重组。相对于传统方法，锌指核酸酶技术提高了基因组定点修饰的效率3-5个数量级，并有极高的特异性。可以在5-8周内实现永久、可遗传的基因删除、插入和修饰。局限性：（1）锌指核酸酶存在上下文依赖效应，即锌指蛋白之间的相互作用可能影响对特定核苷酸序列的识别和结合。（2）在人类基因组中，每隔至少500个碱基才能结合一个ZFN靶点，由模块组装的ZFN不能直接切割染色体。锌指核酸酶工作原理图转录激活样效应因子核酸酶技术转录激活样效应因子核酸酶技术（TALEN） [1]。背景：2007年，在植物黄单胞菌（Xanthomonas）中发现一种特殊的分泌蛋白质，被称为转录激活因子样效应物（Transcription activator-Like effector, TALE）。这种蛋白质具有结合植物宿主基因组并激活转录的能力。2009年，TALE与DNA结合的机制被阐明。2012年，转录激活因子样效应物技术出现，逐渐取代了锌指核酸酶技术。结构及工作原理：TALEN由两个部分组成：特异性识别和结合DNA的区域，即TALE；与ZFN相同的IIＳ型Fok1核酸酶，通过二聚化作用使目标DNA片段发生双链断裂。然后，利用细胞内的修复机制修复损伤。局限性：（1）最初TALEN蛋白只能识别“胸腺嘧啶”。（2）在TALEN上连接重组酶或位点特异性转座酶，可自动完成对基因组的切割和连接，可以在任何细胞中使用（即使在没有NHEJ和HDR修复通路的细胞中），扩大了TALEN的应用范围。然而，这些酶会产生较为明显的脱靶效应。转录激活样效应因子核酸酶工作原理图转录激活样效应因子核酸酶工作原理图：TALEN由N端转运信号、Ｃ端核定位信号、转录激活结构域和 DNA特异性识别结合结构域组成。成簇规律间隔短回文重复序列-相关核酸酶成簇规律间隔短回文重复序列-相关核酸酶技术（CRISPR-Cas） [1]。背景：CRISPR-Cas系统（Clustered Regularly Interspersed Short Palindromic Repeats-CRISPR associated protein）由两部分构成：，即成簇规律间隔的短回文重复序列（CRISPR）及相关蛋白（Cas）。CRISPR序列由高度保守的重复序列（repeat）和间隔序列（spacer）组成。其中，间隔序列来源于外源基因。CRISPR序列附近还有一些相关基因，编码一系列Cas蛋白（核酸酶）。该系统最初是从细菌和古细菌中发现的一种适应性免疫系统，可以抵御病毒和质粒DNA的入侵。它的工作过程分为三个阶段：（1）获取；根据外源基因的原间隔序列临近基序（protospacer adjacent motifs，PAM）确定原间隔序列，Cas蛋白将其切割，整合到CRISPR序列中。（2）表达：间隔序列经过转录、加工成为成熟的crRNA，识别外源基因。（3）干扰：crRNA与特异性Cas蛋白形成核糖核蛋白复合物，特异性切割外源基因。