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簡單染色
簡單染色
(simpie staining)
僅使用單一染劑，用以觀察細胞型態與排列狀態，因細菌核酸與細胞壁某些成分帶有負電，使用帶正電荷染劑(如本次實驗使用的結晶紫)較為適合。
負染色法
負染色法
(Negative staining)
又稱背景染色法，使用酸性帶負電的染劑，因細菌本身帶負電，染劑無法滲透，未染色之細胞透過染色背景而顯現之。
革蘭氏染色
革蘭氏染色
(Gram staining)
為鑑別染色法中最常見的，用以鑑別革蘭氏陽性與陰性菌。革蘭氏陽性菌與陰性菌的差別為細胞壁成分不同，前者由多層肽聚醣組成，能保留染劑。後者由單層或少層肽聚醣組成，較不易保留染劑。
實驗一：簡單染色
實驗步驟：
１.熱固定(取無菌水塗抹載玻片後，沾取菌體塗抹於載玻片後再以鑷子夾取，來回於酒精燈上加熱使水分蒸發。)
2.滴加結晶紫染劑
3.蓋上蓋玻片
4.擦拭多餘水分後置於顯微鏡下觀察
實驗結果(一)
實驗結果(一)
圖中密布的紫色斑點即為經染色後的菌種
實驗二：負染色法
實驗步驟
1.滴加苯胺黑染劑於在玻片上
2.沾取菌體塗抹於染劑
3.使用另一載玻片將之推平
實驗結果(二)
實驗結果(二)
右圖中未被染色的透明圓點即為菌種
實驗三：革蘭氏染色
實驗步驟
1.熱固定兩種菌體
2.初染：使用結晶紫染劑染色
使用ddH2O清洗
3.媒染：使用碘液，加強菌體對染劑的附著力
使用ddH2O清洗
4.去色：使用95%酒精清洗
使用ddH2O清洗
5.回染：使用番紅染劑染色
使用ddH2O清洗
實驗結果(三)
實驗結果(三)
染色的結果如右圖所示，革蘭氏陽性菌(上)因肽聚醣層較厚，較能與染劑分子結合不易脫色，故能保有初染時的顏色(紫)，革蘭氏陰性菌(下)肽聚醣層較薄，不易附著染劑分子，易脫色，故呈現回染時的染劑顏色(紅)。
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