培養與分離技術
培養與分離技術
✩培養基Medium
Plate
Broth(液體)
Slant
Deep(適合厭氧的微生物)
✩菌種介紹
簡稱E.coli
是一種兩頭鈍圓,呈現桿狀,能運動的厭氧菌。
大部分菌株是無毒的,是人體腸道菌株中的一部分,協助人體製造維生素K,防止其他致病菌在腸道中產生。
不過少數血清型可能造成嚴重的食物中毒,偶爾導致食品被召回的汙染事件。
✩微生物培養
步驟:
1接種環在酒精燈上燒紅
2冷卻後沾取單一菌落以鋸齒狀畫分為三區, 每區只能交一個點
3將培養皿倒置於培養箱中16小時
結果說明:菌種集中在第一區,呈米白色,單一菌落直徑約2mm圓形,菌種生長稀少,推測是培養時間不足和沾取的菌量不足。
步驟:
1取稀釋菌液0.1ml,加在培養基表面
2三角玻璃棒放入酒精,過火後冷卻,塗抹培養基,期間培養基和手部都要不停旋轉
3將培養皿倒置於培養箱中16小時
結果說明:菌落總共54個均勻分布在培養基中,生長情形良好,菌落類型一致,都屬於E.coli,表示汙染程度低。
步驟:
1使用tip沾取菌落
2直接將tip退入離心管中
3將培養皿倒置於培養箱中"震盪'16小時
結果說明:判斷E.coli是否成功繁殖的方式在於澄清度,若管內液體透光表示生長情形差,圖中tip完全被遮住,生長情形良好。
✩紫外線對微生物生長的影響
用塗抹法製備三盤E.coli培養皿,分別在日光下照射0分鐘、5分鐘、20分鐘,再置於培養箱16小時,取出觀察。
實驗結果:
共有約54個單獨菌落,培養效果良好。
總菌落數不及五個,可見紫外光照射造成了細菌的死亡。
成果與5分鐘不相上下,可見紫外光照射的影響與時間長短無直接關聯。
✩化學藥劑感受性實驗
用塗抹法塗抹菌液於培養皿上,平均劃分五個區域分別置入不同的藥劑紙錠,於培養箱培養16小時後取出觀察。
實驗藥劑:
1.Ampicillin
2.無菌水
3.蒜頭萃取液
4.70%酒精
5.10%漂白水
實驗結論
貼有漂白水與Ampicilin的紙錠附近可以看出明顯的環狀地帶無菌落生長,可知此二者可以有效抑制大腸桿菌生長。其餘三者則無明顯效果。