SDS Page
下膠的製備過程
實驗步驟
依序加入
H2O 4.6mL
29% Acrylamide Mix 2.7mL
1.5 M Tris (pH 8.8) 2.5mL
10% SDS 100μl
1% TEC 100μl
10% Ammonium Persulfate (APS) 100μl
TEMED 6μl
步驟1的溶液取7.2mL加入玻璃間的縫隙
並緩緩加入水,避免下膠不平整
混和中的膠體
以水測試鑄膠密封度
以肉眼能微微看出膠片之間的間隔
上膠的製備過程
實驗步驟
1.依序加入
H2O 3.4mL
29% Acrylamide Mix 830μl
1.0 M Tris (pH6.9) 630μl
10% SDS 50μl
TEMED 5μl
2.待下膠凝固後,加入上膠、並插入尺梳
上膠未凝固完全而形成不規則形
進行混和的蛋白質待測物
電泳過程
實驗步驟
1.在10個well其中五個加入dye 20μl、其他的分別加入MK 5μl及dye 10μl、Casein 2μg 10μl及dye 10μl、Casein 1μg 10μl及dye 10μl、BSA 2μg 10μl及dye 10μl、BSA 1μg 10μl及dye 10μl
2.電泳槽連接電源供應器
3.等待電泳跑完後,小心將膠體取下
4.照UV光
實驗結果
實驗失敗,在製作上膠時可能因為沒有混合均勻,上膠並沒有完全凝固,後來為了節省時間,所以與他組共用一個膠體,結果又因為與他組的溝通間發生誤會,導致加錯well,所以最終以失敗收場