NMR光譜
NMR Spectroscopy
NMR Spectroscopy
機器上的數字代表外加磁場的頻率,圖中頻率即500MHz,這台機器內有填充液態氮跟液態氦,讓機器內的線圈可以維持超導狀態,製造出超強磁場,在超強磁場下能使原子內的電子躍遷,然後斷掉能量使電子降至低軌域後釋出電磁波頻率,讀取這些頻率後再經過精密的數學計算: Fouier Transform (FT) 傅立葉轉換,可以推出蛋白質的結構。
放置檢測樣本的地方
訊號來自三個鍵內的鍵結,所以TOCSY提供同一個氨基酸內的訊息
NH的化學位移7-10ppm αH的化學位移3-5ppm 第一個氨基酸的NH經常消失,所以五個氨基酸經 常只有四個點
訊號來自小於5A內的原子內,所以NOESY提供氨基酸內和前後氨基酸的訊息
訊號強度和距離有關,所以來自胺基酸內的訊號通常小於來自氨基酸前後的訊號
將兩種光譜疊合一起
選擇任一點,開始上下左右的連接順序為:氨基酸間>氨基酸內>氨基酸間>氨基酸內
序列:NYRRRCKNQN
序列:NYRWRC
今天是第一天來到清大的營隊,抱著興奮的心情開始了今天的第一堂課,今天這一堂課主要是在上nmr光譜的原理,以及如何去分析蛋白質和如何統計、判別蛋白質光譜,一開始蘇世哲教授跟我們介紹了用來分析的機器"核磁共振儀"最讓我驚訝的是他的價錢,850HZ的核磁共振儀價格接近1億!教授還開玩笑說他覺得他每次來上班都開了好幾輛跑車,在課堂中,我們有去參觀這些價值不斐的機器,看到了隱藏於機器中的樣本放置試管,並聆聽助教講解機器的操作細節,及其在生活中的應用,接下來教授有介紹該如何判斷這些圖,我也因此了解了TOSCY與NOESY的差異,緊接著我們便練習了兩道題目來驗證我們的理解程度,一開始我苦惱了很久,塗塗改改一直想不出來,所幸在經過助教和教授耐心的教導後,我學會該如何判斷,也了解到分析nmr光譜的訣竅。