賽曼效應在1896年被發現,解釋它則必須要用20世紀的量子力學。原子核具有自旋角動量,產生磁矩;當原子核置於強外磁場下,因為磁矩方向不同,產生能階分裂(alpha spin / beta spin),這時若給予一個外加的射頻場(無線電波/雷射),原子核將可以從低能階躍遷到高能階態。當原子核落回低能階時,將發出電磁波訊號,於是可以被儀器偵測到;測得的訊號經過傅立葉轉換後成為可用的圖譜。另外,以氫的NMR光譜為例,因為與其鍵結的原子電負度不同,造成電子雲密度以及屏蔽程度不同,在光譜上呈現的訊號強度也會有所改變,稱為化學位移(chemical shift)。
除了一維光譜外,多維光譜也被應用於NMR圖譜:在2D光譜中,TOCSY被用來測量鍵結關係;而NOESY用於測量距離關係。分別用兩法分析多肽,將TOCSY和NOESY光譜疊合,則可以從光譜指紋區的overlap以及位置關係得知胺基酸的排列順序。
核磁共振儀需要產生強大磁場,由電流磁效應滿足;在一般狀況,因為電阻,將會產生高熱等能量損失,所以NMR使用的是超導磁鐵。維持超導效應需要極低溫,所以液態氮(77°K)與液態氦(4°K)被用來維持中央線圈的低溫。也是因為超導效應,核磁共振儀不需要充電,只需要定期補充液態氮和液態氦就好了。
這堂生物光譜課,使用到了一些較難的物理與化學概念,要實際連結學習,需要比較多的時間。不過至少能對重要的NMR蛋白質解析術有初步的認識,知道PDB上寫的"Solution NMR" 的來由和解析方式。實際看到核磁共振儀和內部的重要構造(雖然是壞掉的/便宜的才敢拿出來把玩),讓我們看見紙上理論如何實際展現、應用。這堂課也暗示了基礎裡化的重要,提醒了我們這方面的尚不足。