斑馬魚飼育中心的魚缸擁有完整的水流循環系統,為了斑馬魚的光週期性,這裡也會按時關燈。一缸最多可以養到30隻上下,若單一魚缸魚隻太過密集,則斑馬魚可能會發育不良;由人工餵食,清理魚缸與撈起死魚等也是完全以人工完成。
在下學期的第一堂課,莊永仁教授和我們介紹了斑馬魚:基因高度保留(conserved)、生長快速、胚胎透明等優點,讓斑馬魚從南亞的水塘躋身進入模式生物的行列,成為生物研究的一大助手。這裡飼養的斑馬魚,也是作為生物醫學及基因體學的模式生物之用。
螢光染色細胞團後,使用trypsin將細胞的胞外基質和junction溶解,使細胞團變成單一顆分離的細胞。流式細胞分選儀利用流體力學聚焦(Hydrodanamic focusing)和聲波駐波聚焦,製造單一細胞流,依序通過分析槽的雷射,產生螢光反應。這些光訊號經過光電倍增管的放大後被偵測,轉為電訊號,即可分析細胞的各種特性。
而後的細胞分選則是使用高壓電震盪讓細胞流變成小水珠,水珠攜帶細胞;當水珠中攜帶的是欲分選的細胞時,設定瞬間通電讓水珠帶電。最後,在分流管前設置電板,讓帶電的水珠偏折,不帶電的水珠則直接落下,細胞由是分流。
然而,並非所有的細胞都能通過分選儀,太小的細胞不易偵測,而太大的細胞容易卡住分選儀的內管。
共軛焦顯微鏡與一般顯微鏡最大的不同除了是倒立顯微鏡以外,便是在共焦面多了一層針孔板,擋去焦面以外的光線,去除其他焦面的干擾,影像不會模糊。另外,使用這項技術,幫細胞在不同高度連續拍照,經過軟體校正後,就可以得到細胞的3D模型。
現今在光學基礎上,與計算機結合,還發展出了SIM(structure illumination microscopy)和STED(Stimulated Emission Depletion)等技術,能夠大幅增加解析度,為細胞學研究的一大利器。
NHRI裡的DNA定序法主要還是以傳統定序法為主,在純化的DNA template中加入primer,染色並進行cycle sequencing,酒精沉澱後上機,進行毛細電泳。
另外,國衛院還有提供檢測重複序列的服務,比對親子染色體裡,intron內的重複序列,可以做為親子鑑定之用。
國衛院是國家重要的研究機構,裡面的研究人員也個個學識淵博,這次接觸到他們所研究的內容,是個了解國衛院的好機會。只是,這次的行程頗顯得倉促,四個項目各15分鐘,總共僅有一小時的時間與研究員接觸,略顯得可惜。希望有類似的參訪行程,能夠多加一些項目或拉長每個項目的時間,期許能學到更多東西。