2018/08/27

Configure Bootstrapping の項目を最新インターフェイスへ更新

ローカルで解析する場合

RAxML のファイルを準備します。ここでは「raxmlHPC-PTHREADS.exe」を使います。

まずはじめにKakusan4 のRAxMLフォルダにraxmlHPC-PTHREADS.exe をコピー&ペーストします。

PowerShell を起動して以下のコマンドを入力します（ここではKakusan4 の作業をC:\Kakusan4で行い、ファイル名をSSUphy_ver01_mafft.fas だった場合で書きます）

cd C:\Kakusan4\SSUphy_ver01_mafft.fas.kakusan\RAxML

※フォルダ名は解析に使ったfasta 名で変わるので臨機応変に対応してください。

PowerShell で以下のコマンドを入力します。

raxmlHPC-PTHREADS -T 4 --no-seq-check --no-bfgs -n whole_AICc4_nonpartitioned_singlesearch -s whole.phy -f a -p 1234 -x 5678 -m GTRGAMMA -# 1000 -n outfile

CPU のコア数 (-T 4)
解析に使うファイル名 (-s whole.phy)
ブートストラップ値をbesttree に入力するコマンド　(-f a)
モデルはGTR+G(-m GTRGAMMA)
rapid bootstrap 1000 回 (-# 1000)

これでbest tree とBT をまとめて解析できます。

RAxML_bipartitions.outfile このファイルにBT 値とbest tree が保存されています。

2022/02/01 追記

Cipres で解析する場合

用意するもの

Kakusan4 で出力された以下のファイルを用意

必要なもの

・whole.fas

・whole_AICc4_*****_*****_singlesearch.bat (* は最適モデル)

・whole_AICc4_*****_*****_bootstrap.bat

(・whole_AICc4_*****_*****.partition; Kakusan4 の解析結果 ”whole_AICc4_comparemix.txt” を確認して連結データに対して分離モデルが挙げられた場(= Separate) なら使う、EqualRate ならつかわない)

私の研究ではAICc4 モデルを使うことにしているので、以下の説明はAICc4 の場合と考えてください。

目的によってはほかの推定をつかうべきであることもありえます。詳しくは田辺 (2015) 分子系統科学演習やKakusan4 Manual をご覧下さい。

この2つのファイルをCIPRES にアップロードする。

Task の追加

Input

Input にはアップロードしたwhole.fas を選択する

Tool

ここで解析に使うソフトを選択する。今回はRAxML だが...

Input Parameters

Maximum Hours to Run に注意しながらwhole_AICc4_*****_*****_singlesearch.bat (* は最適モデル)とwhole_AICc4_*****_*****_bootstrap.batに書かれている命令を入力していく。

大抵は以下の情報を入力

• Outgroup [@@@] ；Nixon etr al. 1993 に従って複数のoutgroup を指定する場合はタクサ名を","で区切ることタクサ名の間にspaceは入れない. ちなみにFigTree やMesquite であとからoutgroup を変えることもできる。

→ Nixon KC et al. (1993). ON OUTGROUPS. Cladistics 9: 413-426.

• Specify a random seed value for parsimony inferences (-p) ☑

• Enter a random seed value for parsimony inferences (gives reproducible results from random starting tree) [@@@@→ see singlesearch]

• Use a mixed/partitioned model? (-q) [whole_AICc4_partitioned_codonnonpartitioned.partition]; アップロードするときにファイル名をわかりやすくすると良い

• Estimate individual per-partition branch lengths (-M) * □; これにチェックを付けると領域間の違いを枝長で示すようになるので欠けデータがあるととんでもない樹形ができる。理由が無い限り決してチェックを付けないこと。

Nucleic Acid Options

• Choose model for bootstrapping phase → GTRGAMMA

Protein Analysis Options

• Protain がなければ無視する。アミノ酸をコードしている配列はProtain ではないので注意！

RNA Secondary Structure Options

• 二次構造の解析でなければ無視する。

Binary Matrix Options

• 関係なければ無視。CAT のときのみ使える。

Multiple State Morphological Matrix Options

• 関係なければ無視。

Select the Analysis

• Don't use BFGS searching algorithm (--no-bfgs) ☑

Configure Bootstrapping

• Rapid Bootstrapping (-x) ☑

• Enter a random seed value for bootstrapping + [@@@@→see bootstrap]

• Specify bootstrap protocol ☑Specify an Explicit Number of Bootstraps

• Bootstrap iterations (-N) + [1000]

完了

コーヒーブレイク後には解析は終了している。

問題がなければ解析を開始し、解析後のデータをダウンロードする。

4000塩基ほどならすぐ終わります。