Лабораторно-практична робота
Ознайомлення з будовою мікроскопа. Розгляд препаратів з різними видами клітин дріжджів.
Мета роботи: засвоїти правила користування мікроскопом. Ознайомитися з основними формами бактерій.
Обладнання і матеріали: мікроскоп, готові препарати (мазки) мікробів.
Завдання
1. Ознайомитись із будовою різних (за можливістю) мікроскопів.
2. Вивчити будову біологічного мікроскопа, правила користування ним .
Світловий мікроскоп - це оптичний інструмент, призначений для дослідження об'єктів, невидимих неозброєним оком. Світлові мікроскопи можна розділити на дві основні групи: біологічні та стереоскопічні. Біологічні мікроскопи також часто називають лабораторними, медичними - це мікроскопи для дослідження тонких прозорих зразків у світлі, що проходить. Біологічні лабораторні мікроскопи мають велике збільшення, найбільш поширене - 1000х, але деякі моделі можуть мати збільшення до 1600х.
Стереоскопічні мікроскопи використовують для дослідження непрозорих об'ємних об'єктів (монет, мінералів, кристалів, електросхем і тд.) у відбитому світлі. Стереоскопічні мікроскопи характеризуються невеликим збільшенням (20х, 40х, деякі моделі – до 200х), але при цьому вони створюють об'ємне (тривимірне) зображення об'єкта дослідження. Цей ефект дуже важливий, наприклад, під час дослідження поверхні металу, мінералів і каменів, оскільки дозволяє виявити заглиблення, тріщини та інші елементи структури.
1. Окуляр
2. Насадка
3. Штатив
4. Основа
5. Револьверна головка
6. Об'єктиви
7. Координатний столик
8. Предметний столик
9. Конденсор з ірисовою діафрагмою
10. Освітлювач
11. Перемикач (вкл./вимк.)
12. Гвинт макрометричного (грубого) фокусування
13. Гвинт мікрометричниго (точного) фокусування
Оптична система мікроскопа
Оптична система мікроскопа складається з об'єктивів, розташованих на револьверній голівці, окулярів, а також може включати в себе призмовий блок. За допомогою оптичної системи власне і відбувається побудова зображення зразка дослідження на сітківці ока. Тому важливо звертати увагу на якість оптики, що використовується в оптичній конструкції мікроскопа. Зауважимо, що зображення, отримане за допомогою біологічного мікроскопа, - перевернуте.
Збільшення мікроскопа можна розрахувати за формулою:
ЗБІЛЬШЕННЯ = ЗБІЛЬШЕННЯ ОБ'ЄКТИВА Х ЗБІЛЬШЕННЯ ОКУЛЯРА.
Сьогодні у багатьох дитячих мікроскопах використовується лінза Барлоу, з коефіцієнтом збільшення 1.6 х або 2х. Її застосування дозволяє додатково плавно підвищити збільшення мікроскопа понад 1000крат. Користь від такої лінзи Барлоу вельми сумнівна. Її практичне застосування призводить до істотного погіршення якості зображення, і в рідкісних випадках може виявитися корисним. Але виробники дитячих мікроскопів успішно використовують її в якості маркетингового ходу з метою просування своєї продукції, адже часто батьки, досконально не розібравшись у технічних параметрах мікроскопа, вибирають його за хибним принципом "чим більше збільшення, тим краще". І, звичайно ж, жоден професійний лабораторний мікроскоп не буде мати в комплекті такої лінзи, що безперечно погіршує якість зображення. Для зміни збільшення в професійних мікроскопах використовується виключно комбінація різних окулярів і об'єктивів.
У разі наявності лінзи Барлоу формула розрахунку збільшення мікроскопа приймає наступний вигляд:
ЗБІЛЬШЕННЯ = ЗБІЛЬШЕННЯ ОБ'ЄКТИВА Х ЗБІЛЬШЕННЯ ОКУЛЯРА Х КОЕФІЦІЄНТ ЗБІЛЬШЕННЯ ЛІНЗИ БАРЛОУ.
Механічна система мікроскопа
Механічна система складається з тубуса, штатива, предметного столика, механізмів фокусування, револьверної головки.
Механізми фокусування використовують для фокусування зображення. Гвинт грубого (макрометричного) фокусування використовують під час роботи з малими збільшеннями, а гвинт точного (мікрометричного) фокусування – під час роботи з великими збільшеннями. Дитячі і шкільні мікроскопи, зазвичай, мають тільки грубе фокусування. Однак, якщо Ви обираєте біологічний мікроскоп для лабораторних досліджень, наявність тонкого фокусування є обов'язковою. Зверніть увагу, на малюнку наведено приклад біологічного мікроскопа з роздільними точним і грубим фокусуванням, при цьому в залежності від конструктивних особливостей багато мікроскопів можуть мати коаксіальні гвинти макро - і мікрометричного регулювання фокуса. Зазначимо, що стереомікроскопи мають тільки грубе фокусування.
В залежності від конструктивних особливостей мікроскопа фокусування може здійснюватися переміщенням предметного столика у вертикальній площині (вгору/вниз) або тубуса мікроскопа з його оптичним блоком також у вертикальній площині.
На предметному столику розміщується досліджуваний об'єкт. Існує кілька видів предметних столиків: нерухомий (стаціонарний), рухливий, координатний та інші. Найбільш комфортним для роботи є саме координатний столик, за допомогою якого Ви можете переміщати досліджуваний зразок в горизонтальній площині по осях Х і У.
На револьверній голівці розташовані об'єктиви. Повертаючи її, Ви можете вибирати той чи інший об'єктив, і таким чином змінювати збільшення. Недорогі дитячі мікроскопи можуть бути оснащені незмінними об'єктивами, у той час як у професійних біологічних мікроскопах використовуються змінні об'єктиви, що вкручуються в револьверну голівку за стандартною різьбою.
В тубус мікроскопа вставляється окуляр. У випадку бінокулярної або тринокулярної насадки є можливість регулювання міжзіничної відстані та корекції діоптрій для адаптації під індивідуальні анатомічні особливості спостерігача. У випадку дитячих мікроскопів в тубус спочатку може бути встановлена "шкідниця" лінза Барлоу, а вже в неї - окуляр.
Освітлювальна система мікроскопа
Освітлювальна система складається з джерела світла, конденсора та діафрагми.
Джерело світла може бути вбудоване або зовнішнє. Біологічні мікроскопи мають нижнє підсвічування. Стереоскопічні мікроскопи можуть бути оснащені нижнім, верхнім і бічним підсвічуванням для різних типів освітлення препаратів. Дитячі біологічні мікроскопи можуть мати додаткове верхнє (бічне) підсвічування, практичне застосування якої, насправді, як правило, є безглуздим.
За допомогою конденсора та діафрагми можна регулювати освітлення препарату. Конденсори бувають однолінзові, дволінзові, трьохлінзові. Піднімаючи або опускаючи конденсор, Ви відповідно конденсуєте або розсіюєте світло, що потрапляє на зразок. Діафрагма може бути ірисовою з плавною зміною діаметра отвору або ступінчастою з декількома отворами різних діаметрів. Так зменшуючи або збільшуючи діаметр отвору, Ви відповідно обмежуєте або збільшуєте потік світла, що падає на досліджуваний об'єкт. Також відзначимо, що конденсор може бути оснащений фільтротримачем для установки різних світлофільтрів.
Основні правила користування мікроскопом:
1. Мікроскоп необхідно захищати від попадання пилу і вологи; після роботи ставити у футляр (якщо він є) або накривати тканиною.
2. На робочому столі мікроскопи ставлять ручкою до себе на відстані 3–5 см від краю стола.
3. Об’єктиви та окуляри треба протирати замшею або байкою.
4. Під час роботи з об’єктивами малого і середнього збільшення тубус переміщувати лише макрометричним гвинтом.
5. Не залишати тубус мікроскопа відкритим, тобто без окуляра, тому це призводить до накопичення пилу в тубусі і забруднення об’єктивів.
6. Під час зміни об’єктивів потрібно регулювати інтенсивність освітлення об’єкта, що розглядається. Ступінь освітлюваності регулюють, опускаючи чи піднімаючи конденсор. Під час розглядання препарату з об‘єктивом 8 конденсор опускають, при переході на об’єктив 40 конденсор трохи піднімають, а під час роботи з об’єктивом 90 конденсор піднімають вгору до предметного столика.
7. Під час роботи з об’єктивом 8 відстань від препарату, що досліджується, до конденсора повинна бути біля 1 см, з об’єктивом 40 – 0,6 см, з об’єктивом 90 – біля 0,15 мм.
8. Препарат розглядають у декількох місцях, пересуваючи предметний столик боковими гвинтами. Одночасно повільно (не більше, як на півоберту) повертають мікрогвинт із метою фокусування об’єктива. Під час заміни одного об’єктива іншим місце препарату необхідно підвести точно в центр поля зору і лише після цього повернути револьвер із об’єктивом. Для цього великим і вказівним пальцями беруться за основу об’єктива і повільно обертають револьвер до появи клацання. Це свідчить про те, що об’єктив прийняв робоче положення.
9. Щоб отримати максимальне освітлення поля зору встановлюють об’єктив найменшого збільшення на відстані від препарату приблизно 1 см. Спостерігаючи в окуляр, направляють відбиті дзеркалом промені від джерела світла через отвір діафрагми конденсора на об’єктив. Якщо установка зроблена правильно, поле зору мікроскопа буде мати форму кола, яке добре і рівномірно освітлене. Пряме сонячне освітлення “пом’якшують”, розміщуючи між дзеркалом і конденсором у спеціальному тримачі матове скло; штучне освітлення – розміщуючи синє прозоре або матове скло, яке знебарвлює світлові промені.
2. Розглянемо дріжджі під мікроскопом:
Завдання для контролю знань:
1. Описати оптичний пристрій біологічного мікроскопа.
2. Яких правил потрібно дотримуватися під час користування і догляду за мікроскопом.
3. Які основні форми бактерій ви знаєте?
Оформіть висновок: