Nitro compostos oxidam o hidróxido ferroso (verde) a hidróxido férrico (cor de ferrugem) em meio alcalino, que são, por sua vez, reduzidos à amina. Praticamente todos os nitrocompostos dão ensaio positivo em menos de um minuto, sendo que para os solúveis em álcali, como o ácido 4-nitrobenzóico, a resposta é quase imediata. Outros grupos oxidantes da química orgânica, como nitroso, quinona, nitrato e nitrito, também oxidam o hidróxido ferroso a férrico (COSTA NETO, 2004, p.533).