林立元 教授
實驗目的:透過紅墨水的吸光值(Abs.)檢測,熟悉光譜儀基礎操作。
實驗步驟:
(1)操作光譜儀,用個波段燈卡測試紅墨水的吸光值(Abs.),並從中找出紅墨水吸光值最大的相對應波段燈卡(515nm)。
(2)選用燈卡(515nm)測試紅墨水在不同濃度(對半稀釋)下的吸光值
(3)使用Excel表格畫出standard curve
(4)最後用全光譜儀精確測量紅墨水最高吸光值的波段
515nm有最高吸光值
Standard Curve
R平方=0.9998
X 軸:稀釋倍率,Y 軸:吸光值
全光譜儀精確測量
最高波段514nm
實驗目的:使用光譜儀,觀察吸光值的變化,實質確認光合作用的進行。並在之中混入DCMU以觀察到【因電子被搶先拿走而不能還原的DCIP】的事實。
實驗原理:藉由DCIP因葉綠體被光照而接收到其中激發出的電子而從藍變透明的特性,造成溶液的吸光值的變化,並在之中混入DCMU以觀察到【因電子被搶先拿走而不能還原的DCIP】的事實。
實驗步驟:
(1)分離葉綠體 用研缽研磨碎綠葉並用茶葉袋過濾
(2)稀釋葉綠體至吸光值0.4-0.6
(3)加入100ul的DCIP並將調配好的溶液2ml加入cuvette(使用590nm的燈卡 )
(一)將裝有上述溶液的cuvette放入光譜儀,30s紀錄一次吸光值。
(二)將裝有上述溶液的cuvette放入光譜儀,並用手電筒照射,30s紀錄一次吸光值。
(三)將裝有上述溶液的cuvette加入DCMU再放入光譜儀,並用手電筒照射,30s紀錄一次吸光值。
理論上(Abs.):
(一)持平,不會變化 因為沒有光照,光合作用不反應,DCIP不變色
(二)下降 因為有光照,光合作用反應,DCIP變透明,Abs.下降
(三)持平,不會變化 雖然光合作用反應,但DCMU先拿走電子,DCIP不變色,Abs.不變
實際結果(大概):
(一)微微上升後持平
(二)大幅下降後持平
(三)大概持平(0.31上下波動)
在最後一天的課程中,我們主要學習到了光譜儀的基本操作,並且更加深入的探討了光合作用中光反應的詳細過程,透過DCIP和DCMU的反應,我直觀的用肉眼從數據中看出光反應的進行對於化學物質所造成的影響,在這個過程中,我們同時進行著實驗的操作以及在腦中構畫出光反應系統的過程,雖然有些燒腦,且在過程中也有一些小失誤,但最後還是成功的看到了想要的數據,獲得滿滿成就感,結束了這一次的暑期營隊。