黃禎祥老師
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分子遺傳實驗
台灣鴨品種介紹（樣品）
北京鴨
北京鴨
英語：Pekin duck
學名：
Anas platyrhynchos domesticus
是家鴨的一種，由綠頭鴨馴化而成的品種，於民國４３年由農復會引進，純白、體型碩大，後經傳至歐洲而成為世界知名品種。
疣鼻棲鴨
疣鼻棲鴨
俗稱：番鴨仔、麝香鴨、紅面鴨、番鴨（Muscovy duck）
學名：Cairina moschata
臺式料理中的「薑母鴨」偏愛使用這種鴨類的肉做為主材，紅面鴨原產地為中南美洲一帶，黑色番鴨於荷西時期引進台灣。其最大特徵為臉處有紅色肉疣。
土番鴨
土番鴨
俗稱：Mule duck
學名：Cairina anac
為公正番鴨與褐色母菜鴨或改鴨之雜交體，其本身不具生殖能力，佔台灣肉鴨消費市場百分之七十左右，肉質鮮美，為優良之肉用品種。
PCR反應
PCR反應
ＰＣＲ（Polymerase chain reaction）是甚麼？
一項利用DNA雙鏈複製的原理，在生物體外複製特定DNA片段的核酸合成技術，可在短時間內大量擴增目的基因（標的基因）。
ＰＣＲ如何運作？
＂變性-黏合-延伸 ＂
DNA 變性 (Denaturation)：利用高溫使 DNA 模板變性打開
引子黏接 (Annealing of primers)：讓引子藉由專一性與目標 DNA 片段進行結合
引子延展 (Extension of primers)：DNA 聚合酶開始複製目標 DNA 片段
重複步驟：依序重複執行前三步驟，製作更多的目標 DNA 片段
實驗
實驗說明：
1.目的：此次實驗主要在測定目標物種的粒線體DNA，進而判定母親品種
2. 實驗原理：藉由找到目標染色體上的基因序列並切斷後，利用電泳分析DNA，即可辨別性別
實驗器材與藥品：
2X Powerpol MasterMix 60μl
ddH₂O 300μl
rCutSmart buffer 20μl
Sma1 酵素(須保持-20°C低溫維持酵素環境)
Sma1 primer(Forward) 5μl
Sma1 primer(Reverse) 5μl
DUCK DNA：Pekin/Mule/Muscovy 5μl
聚合酶連鎖反應儀
八連PCR管一個
1X TAE buffer 20ml
LE agarous powder 0.3g
Gel stain 1μl
電泳槽
實驗步驟：
第一部分：ＰＣＲ
1.取1離心管，加入ddH₂O 52.5μl、2X Powerpol MasterMix 62.5μl、Sma1 primer(Forward)2.5μl、Sma1 primer(Reverse)2.5μl (共120μl)
2.取4離心管，分別加入24μl先前所配之液體，再分別加入1μl Pekin、Mule、Musc、NC的DNA
3.離心後放入聚合酶連鎖反應儀
第二部分：限制酶內切
1.取４個空離心管，分別加入20μlPCR產物
2.加入rCutSmart buffer 5μl
3.加入ddH₂O 24μl
4.加入Sma1 酵素1μl
5.離心後進PCR儀器
第三部分：電泳
1.將凝膠(gel)置入電泳槽，並灌入TAE緩衝液
2.將各樣品按順序用Pipetman各灌注5µl至凝膠的well中
3.蓋好蓋子，打開電源
4.約15分鐘後可見DNA樣品已離開起點一段距離，可取出觀測。
5.用膠體觀察箱拍攝，判讀最終結果。
實驗結果：
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