培養與分離技術
Culture Inoculation
Culture Inoculation
Culture Inoculation 微生物培養方法
劃線法 (streak-plate method)
接種環以酒精燈燒紅後冷卻。
接種環沾取單一菌落後開始以鋸齒狀畫於培養基(如圖)。
將培養皿倒放於37℃培養 16小時。
塗抹法 (spread-plate method)
將稀釋的菌液取0.1ml,加在已凝固的培養基表面上。
將浸泡於95%的三角玻璃棒取出過火,冷卻後塗培養基。
塗抹均勻後將玻璃棒過火,放回95%酒精中,將培養皿倒放於37℃培養16小時,隔天觀察菌落數。
液態培養法 (broth method)
以P200接tip,沾取單一菌落。
tip尖端深入離心管之培養液中攪拌並同時 pipeting。
將培養液置於37℃培養箱中,震盪培養16小時,隔天觀察結果。
實驗目的
分離出單一菌落 (single colony),並觀察與紀錄出菌落之形狀、大小、顏色等特性。
所需器材
接種環 (loop)
三角/L型玻璃棒
酒精燈 (alcohol lamp)
微量吸管分注器 (pipetman+tip)
培養皿 (dish)、培養液 (broth)
全部器材
每次沾取單一菌落前後均須將接種環以火焰燒紅並冷卻 (全程無菌)
每次使用三角玻璃棒前後得先泡在酒精裡,再拿到火焰上燒幾秒
結果紀錄
劃線法 (streak-plate method)
雖然步驟正確,我們的菌落數卻只有 9CFU,正常情況下應該是要有 30~300CFU (colony forming unit)。可能的原因應該是在畫第三區時,所接觸第二區的菌量不足導致。
塗抹法 (spread-plate method)
總共有47個single colonies,但是上面觀測到的兩種菌種都不是E. coli
液態培養法 (broth method)
相較於右管(別組),我們這組的透光度較低,代表細菌生長較多
若broth非常清澈 (如右管),代表幾乎沒有細菌生長