葉綠體光反應實驗Chloroplasts_Light Reactions

測試葉綠體分別在「全黑、照光、加入高/低濃度DCMU」之下的活性，探討吸光值的變化與溶液顏色。

1. 以蔗糖水溶液作為等張溶液，從植物中分離出葉綠體並過濾

2. 以蔗糖水溶液作為溶劑，調出適合的濃度：依序以cuvette每次稀釋2倍，直至Abs.值(吸光值) 0.4-06

3. 完成後加入100μL DCPIP混合均勻，測量於 590 nm 的吸光值 (使用 590 nm 的燈卡)

4. 依照四個欲探討的項目各操作不同的變因 (詳見底下結果紀錄)

• DCPIP平時成藍色、還原態呈無色，故我們以DCPIP作為指示劑，判斷說當cuvette裡溶液顏色變淺，DCPIP就是有接到電子，進一步推論出電子傳遞有在進行，代表光合作用光反應也在進行；而測定變色的客觀方式就是以 spectrophotometer(分光光度計) 測量出 cuvette 所承裝的溶液的Abs.值 (吸光值)：顏色越淺，透光度越高，Abs.值越低。

• DCMU作為DCPIP的對手，會搶走DCPIP要接收的電子，所以DCMU是作為此實驗電子傳遞的抑制劑；加入濃度越高的DCMU，cuvette裡溶液的顏色就更沒有變化，因為DCPIP變成還原態的途徑受阻斷了。

1. 全黑：因為在無照光的情形下無法行光反應，就不會有電子傳遞的情形，所以DCPIP接不到電子，自己無法變成還原態，故cuvette裡的溶液顏色不變   ⇒Abs.值照理不會掉

2. 照光：cuvette裡的溶液顏色明顯變淡，因為光照下光反應會正常進行   ⇒Abs.值會明顯下降 (正常會掉超過0.2)

3. 加入 1 mM DCMU：因為DCPIP受DCMU作用的限制，電子傳遞的情形被阻斷，故cuvette裡溶液顏色不變   ⇒Abs.值照理不大會掉

4. 加入 0.01 mM DCMU：因為DCMU濃度較低，抑制DCPIP接收電子的效果就沒有那麼好   ⇒Abs.值會下降但幅度不大