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不同波長色光測試
各波長燈卡吸光值
波長（nm）/吸光值（A）
紫：405/0.0757
藍：470/0.1307
綠：515/0.2076
黃：590/0.0130
橘：615/0.0088
紅：648/-0.017
◀ 濾光鏡頭：可以做出不同波長的光，測 試樣本在不同波長光下的透射率
左至右：
648nm
615nm
590nm
515nm
405nm
TR：透射比 transmission
Abs：吸光度 = - ㏒ T
L：亮度 light
紅墨水透射率測試
繪製 standard curve
1.選用波長515nm之燈卡
稀釋倍率/吸光值（A）：
1：1
1/2：0.05376
1/4：0.229
1/8：0.1307
1/16：0.0809
1/32：0.0606
2.選用波長470nm之燈卡
稀釋倍率/吸光值（A）：
1：0.6777
1/2：0.2441
1/4：0.1487
1/8：0.0705
1/16：0.0457
1/32：0.0087
欸？？
我們不是進行對半稀釋？
樣品的量怎麼都不一樣？
這樣測出來會準嗎？
因為這位仁兄的微量吸取器底部有空氣每次取的定量都不是定量（全員瘋掉+笑死）
但是最神奇的事是這樣測出來還滿準的
這是什麼負負得正嗎？
全部都不準最後就會對了？
葉綠體光合作用實驗
材料與試劑：
紅莧菜、0.05%DCIP 、1mM DCMU、0.5M 蔗糖液
設備：
研缽、茶葉袋、Pipetmen、燒杯、Cuvette、光譜儀、量筒、手電筒
步驟：
1.將紅莧菜放入研缽搗成泥狀，分離葉綠體（置於冰上）
2.使用蔗糖液稀釋葉綠體至吸光值0.4~0.6
3.加入110μLDCIP混合均勻，測量於590nm 的吸光值（A590,zero time control）
結果記錄：
【全黑】：將cuvette 留在光譜儀中，每30秒記錄一次A590
時間（秒）/吸光值(A590)：
0/0.5528
30/0.5376
60/0.5528
90/0.5376
120/0.5376
150/0.5376
【照光】：重複步驟（2）和（3），用手電筒從上方貼附cuvette 照射，每30秒記錄一次 A590
時間（秒）/吸光值（A590）
0/0.9208
30/0.6777
60/0.6777
90/0.6777
120/0.6777
150/0.6777
【加DCMU】：重複步驟（2）和（3），但在加入 DCIP之前，先加人100μLDCMU反應2min，再用手電筒照射cuvette，每30秒記錄一次A590
時間（秒）/吸光值（A590）
0/0.8538
30/0.8538
60/0.8538
90/0.8538
120/0.8538
150/0.8538
◀ 將紅莧菜放入研缽搗成泥狀，分離葉綠體
用手電筒從上方貼附 ▶ cuvette 照射
心得
這次是完全沒有接觸過的實驗。首先是用儀器測量各可見光波長的吸光值，接著使用紅墨水和ddH2O 相互比較，測量紅墨水的透色率。我們使用了綠光和藍光兩種光來比較兩者間的差異。最後下午則是用紅莧菜來作為葉綠體光合作用的實驗所需原料，將紅莧菜放入研缽搗成泥狀後，用蔗糖液不斷稀釋過濾葉綠體，直到吸光值介於0.4~0.6之間為止，我們很幸運的稀釋兩遍就成功了；接著加入110μLDCIP混合均勻，測量於590nm 的吸光值，並記錄在全黑、照光、加dcmu三種下的差異。這次的實驗雖然沒有太多需要用到高超技巧的地方，但卻也沒有想像中的容易，需要耐心和謹慎。但這次以往不太有機會的進行的實驗，使我的知識庫得以擴展，也學習到未知的理論，令我收穫頗豐。
07.12（五）
資訊來源：
上課講義
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