Déroulement

Le laboratoire récupère le tube de récolte qui contient l’éjaculat. Les laborantins procèdent alors au contrôle en frais et examinent les paramètres suivant :

• Volume de l’éjaculat

• Sa concentration en spermatozoïdes

• Motilité massale des spermatozoïdes

• Motilité individuelle des spermatozoïdes

La mesure du volume de l’éjaculat se fait généralement par pesée.

Les deux derniers paramètres peuvent être mesurés au moyen d’un système CASA si le centre en possède un. Si ce n’est pas le cas, la mesure se fait avec une loupe binoculaire.

Les lames d’examen doivent également être maintenues à une température avoisinant 35 °C pour éviter tout choc thermique.

Si les paramètres mesurés ne correspondent pas aux critères du centre, l’éjaculat est éliminé.

Si les critères sont respectés, l’éjaculat peut être dilué. L’ajout du dilueur permet tout d’abord d’augmenter le volume de l’éjaculat pour inséminer un nombre plus important de femelles, mais également d’ajouter un cryoprotecteur.

Une fois dilué, l’éjaculat est plus généralement appelé semence.

Après la dilution de l'éjaculat, la semence doit atteindre une température de 4 °C. Ce processus est appelé refroidissement et dure une heure au minimum.

Les paillettes sont prêtes à être congelées. Pour ce faire, elles sont disposées sur des rampes de congélation et placées dans un congélateur qui suit une courbe de congélation précise.

La température, initialement à 4 °C, atteint -8 °C à raison de 5 °C par minute, puis descend à -140 °C à raison de 40 °C par minute.

Dans le congélateur, les paillettes ne sont pas en contact avec de l’azote liquide, leur congélation se fait aux vapeurs d’azote. Lorsque leur température atteint -140 °C, les paillettes sont plongées dans des cuves d’azote liquide à -196 °C. La congélation est alors complète.

Après avoir été congelée, la semence doit passer un dernier contrôle pour s’assurer que suffisamment de spermatozoïdes de l’éjaculat résisteront à la congélation. Deux paillettes d’un même lot sont sélectionnées au hasard et décongelées. Une goutte de semence est placée dans un système CASA qui calcule précisément la motilité massale et individuelle des spermatozoïdes décongelés.

Si les analyses ne sont pas concluantes, l’ensemble du lot est éliminé.

Si le lot remplit l’ensemble des critères lors du contrôle post-congélation, il est placé en zone de quarantaine pendant un mois. La quarantaine permet de s’assurer que le taureau n’était pas en période d’incubation d’une maladie lorsqu’il a produit l’éjaculat.

Une fois congelée, la semence se conserve indéfiniment. La cuve dans laquelle les paillettes sont stockées doit être régulièrement réapprovisionnée en azote liquide.

Pour organiser le rangement des paillettes et les retrouver plus facilement, elles sont placées dans des canisters et des visotubes.

Une fois que les chaleurs sont confirmées et que le moment optimal pour l’insémination est déterminé, il faut décongeler une paillette grâce à un décongélateur de paillettes rempli d’eau entre 34 et 38 °C. La paillette y est immergée pendant 30 secondes.

Pour procéder à l’insémination, il faut d’abord préparer le pistolet d’insémination. La paillette est insérée dans le mandrin du pistolet et son extrémité est coupée. La gaine, à usage unique, est placée sur le pistolet et une chemise sanitaire recouvre l’ensemble. Une fois que le pistolet est prêt, il doit rester au chaud jusqu’au moment de l’insémination, il est donc conseillé de le garder contre son dos sous ses vêtements ou dans sa botte.

Une main est insérée dans le rectum de la femelle et se place au niveau du col de l’utérus. Le pistolet d’insémination est inséré dans le vagin de la femelle et la chemise sanitaire est perforée au moment du passage du col de l’utérus pour libérer l’extrémité du pistolet. L’inséminateur appuie sur le poussoir pour éjecter la semence au niveau du corps de l'utérus, puis il peut retirer le pistolet des voies génitales.