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林立元
林立元
嗯沒錯還是這位很電的老師~
信箱：lylin@life.nthu.edu.tw
辦公室：生科二館618室
辦公室電話：03-5742693
實驗室分機：03-5715131 #34375
學歷：美國康乃爾大學博士
領域：分子生物學、分子毒理學
光譜儀基礎操作與葉綠素光譜掃描
<使用各種波長的燈卡測量紅墨水的吸光值>
<使用波長515nm的燈卡測量不同濃度下紅墨水的吸光值>
這些是各種濃度的紅墨水
左到右是1、0.5、0.25、0.125、0.0625
(把原樣品濃度當作1 )
呈現出一條很棒的斜直線，R2 =0.9984
吸光值隨濃度下降而減小，成正比關係
葉綠體光反應實驗
磨菠菜的部分
磨菠菜的部分
嗯其實就是一直磨，把它磨爛
我要成為菠菜狂磨！
將葉綠體稀釋至吸光值=0.4~0.6
加入100µl的DCIP(0.05%)與100µl的葉綠體溶液混均勻
<觀察葉綠體在全黑情況下吸光值的變化>
使用波長590nm的燈卡，將裝有混和液的比色管留在光譜儀中，每30秒記錄一次吸光值
從圖表可以發現在不照光時，溶液的吸光值維持固定值，只有在第三十秒時出現不一樣，可能是那個時候動到儀器，或是插座剛好跳一下，改變燈卡的亮度(？
由此可知葉綠體在不照光的情況下無法進行光反應
<觀察葉綠體在照光時的吸光值的變化>
過程中用手電筒照射比色管中的混和液，每三十秒暫停計時，並蓋上蓋子測量吸光值
從圖表可以發現前面吸光值有遞減，但是降到了0.5686之後就不再下降，應該是因為葉綠體已經和DCIP反應完而造成的。
由於時間間隔取30秒，無法充分觀察到吸光值遞減的過程，因此......
<觀察葉綠體在照光時的吸光值的變化~~進化版>
趁實驗全部完成後的時間，我們將測量間隔時間改為10秒，希望能更清楚的觀察吸光值遞減的過程
從圖表看起來，感覺吸光值的變化量會隨著時間增加而先增加再減少
到了第70秒反應結束，吸光值不再變化
<觀察葉綠體在加入DCMU時再照光的吸光值變化>
比色管在加入DCIP前先加入100µl的DCMU(1mM)反應兩分鐘
DCMU可以抑制葉綠體和DCIP的反應
從圖表就可以看出1mM的DCMU對葉綠體的抑制力就很強了，吸光值一值維持定值，無法發生反應
抑制太強不好玩，所以......
<觀察葉綠體在加入DCMU時再照光的吸光值變化~~低濃度版>
將加入比色管的DCMU濃度從1mM調整為0.01mM，一樣先反應兩分鐘
灰色：沒加DCMU
橘色：1mM的DCMU
藍色：0.01mM的DCMU
從圖表可以很清楚的看出加入0.01mM的DCMU的葉綠體有和DCIP發生反應，但有受到DCMU的抑制效果
以上就是本次課程進行的實驗啦~
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