CEL-I 精製

投稿日: 2016/09/09 10:04:10

ゲノム編集の実験でよく使うCEL-I （ヌクレアーゼ）をセロリから抽出しました。

CEL-I の "CEL"は、celeryのCELだそうです。

セロリ 5 kg からスタート。

（セロリは農薬研のOBの方からの頂き物です。ありがとうございます。）

ジューサーでセロリジュースにします。

（ジューサーは前のラボからお借りしました。ありがとうございます。）

セロリジュースを遠心中。

（遠心機は化学生態の小野さんにお借りしました。いつもありがとうございます。）

いくつかのステップを経て、最終的に ~55 ml の粗精製液となりました。

ヘテロ個体のgPCR産物で活性（下にバンドが表れる）を確認できました。

NC, ネガコン（酵素無し）; PC, ポジコン（4年前につくばで精製したもの）; lanes 1–7, 組精製液の1/2希釈系列

粗精製液なので夾雑物がたくさん入っていますが、変異検出には十分使えます。

ちなみに、55 mlでおよそ 55,000–220,000反応分となり、

この反応分を市販品で賄うとすると、、、¥25,000,000–¥100,000,000 (?!)

これが売れたら、セロリとジューサーと遠心機が買えますね。