以手電筒照射光碟片。

又稱分光光度計(spectrophotometer)。

光源經光柵色散，再經過出射狹縫使單一波長色光出射通過比色管(cuvette)，最後以偵測器偵測光強度，算出物質的吸光值(Abs)。

T = I / I₀ 

Abs = -logT = αcl

（α: 常數吸收係數；l: 光徑長；c: 濃度）

由上圖，紅墨水對515nm之光線有最高的吸光率。

全光譜掃描測量樣本對400~700nm光的吸光度。裝入2管標準液後按Return → Base Line → 2，再將1管換成待測液，按Start → 2(pick) → 1(trace)。

由上圖，紅墨水對528nm光有最高吸光率。

全黑情況下，光反應中不會電子釋出(不會進行光反應)，因此DCIP無法被還原，Abs值不改變。

光系統之電子傳遞被DCMU抑制，DCIP保持原樣，Abs值不改變。