1. 將上述材料依照順序加入離心管中

2. 期間離心管請至於冰上

3. 用pipetman吸取配置好的stacking gel加入上一過程吸乾水的空間

*加入的速度不能太快，避免衝破下膠

4. 上膠加滿後插入齒書(盡量不要有氣泡)

5. 於室溫靜待電泳膠凝固30-60分鐘後，即可開始跑膠實驗

1. 先將配置好的膠連同鋁片以及玻璃片從膠台上取下

2. 於水槽邊操作，把齒書拆下來  *過程須持續沖水*

3. 拆下來之後加水至well中，把氣泡沖乾淨

4. 用夾子將膠體組夾於電泳槽內(同樣玻璃朝外鋁片朝內)

5. 另一側再以一片玻璃夾住

6. 加入約300ml的1X running buffer 

7. 玻璃與電泳槽空隙部分用滴管填滿buffer

1. 填滿完buffer以後

2. 以pipetman在well裡加入以下蛋白質：

   • BSA (牛血清白蛋白)

   • casein (酪蛋白)

   • 蛋白質Marker

   • dye

3. loading完成好後即可開始跑膠

1. 將電泳槽與電源供應器連接

2. 初始的30分鐘電壓調製90V

3. 當膠跑至下膠處，將電壓調整至170V

4. 當dye跑至底下buffer時則可停止跑膠

1. 當跑完膠後，將夾子拆除  *過程中全程保持膠體濕潤以免膠體破裂*

2. 使用鏟子將玻璃和鋁片分離，膠體會黏在其中一片上

3. 用鏟子把上方多餘膠體切除

4. 下方則輕易刮起，放置於水盆中  *同樣保持濕潤*

5. 最後移至UV box拍取影像

• 跑完之後的蛋白質電泳影像分為兩種

  1. 為可見光底下可看見的蛋白質marker

  2. 為UV照射下的蛋白質影像圖

• 經比對後可以做出以下excel圖表