微生物學實驗

1. 分類：#細菌(bacteria)、原生生物(protoza)

藻類(algae)、病毒(virus)

真菌(fungi) ⊇ 酵母(yeast)、黴菌(molds)

2. 細胞結構：真核、原核

3. 生存環境：通常極為極端　Ｅｘ：深海、熱泉、南北極

4. 發現史：                               17世紀↼—　(自然發生說)　—⇀1895

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                       發酵食品           雷文霍克                                     巴斯德

                                               ⇨自製顯微鏡                              ⇨生物發生說

                                                                                               ⇨發現酒、酵母菌的關聯

                                                                                               ⇨巴斯德滅菌法：100℃以下消滅微生物，主要用在消毒酒、牛奶、果汁

#細菌(bacteria):

• 形狀：球(單球、雙球、鏈球菌)、桿(長、短)、螺旋

• 有些具有莢膜可以抗拒吞噬及黏附於寄主細胞

• 鞭毛：周鞭毛、端鞭毛、多鞭毛、單鞭毛等

順時針旋轉：細菌向前游動

逆時針旋轉：細菌滾動

實驗步驟

1. 接種環在酒精燈上燒紅後，等待冷卻(約10至15秒)

2. 接種環輕輕沾取E.coli菌落後，以閃電型塗至培養基上

3. 重複步驟1、2三次

4. 將培養基倒置於37〫C的培養箱中16小時

5. 隔天觀察結果

*燒紅的目的是要滅菌以分離出單一菌落*

實驗步驟

1. pipetman吸取0.1ml的稀釋菌液，加在培養基上

2. 三角玻璃棒浸泡於95%酒精中，取出過火殺菌，等待冷卻

3. 以三角玻璃棒均勻塗抹菌液至培養基上 *培養基一邊旋轉，玻璃棒一邊畫圈，確保每個區域都塗到*

4. 將三角玻璃棒過火後放回95%酒精中

5. 培養基倒置於37〫C的培養箱中16小時

6. 隔天觀察結果

實驗步驟

1. pipetman接tip輕輕沾取E.coli 菌落

2. 離心管(內含培養液)打開，開口處過火

3. 將tip直接退入培養液中，pipeman不伸進離心管

4. 再次把離心管開口處過火

5. 培養液置於37〫C的培養箱中震盪培養16小時

6. 隔天觀察結果

實驗步驟

1. 取100µl的大腸桿菌稀釋液並使用三角玻棒均勻塗抹於培養基中

2. 重複前述製做兩個相同的樣本

3. 將兩個樣本至於陽光下，打開培養皿的蓋子，分別放置5分鐘與20分鐘

4. 時間到後，將培養皿倒置於37〫C的培養箱中16小時

5. 隔天觀察並記錄菌落分布

實驗步驟

1. pipetman取100µl的大腸桿菌原液至於培養基中

2. 將三角玻璃棒從95%酒精中取出過火，等待冷卻

3. 以三角玻璃棒均勻塗抹菌液至培養基上 *培養基一邊旋轉，玻璃棒一邊畫圈，確保每個區域都塗到*

4. 鑷子過火後冷卻，用鑷子夾取Amp紙錠放置於培養皿中

5. 再將鑷子過火後冷卻，夾取圓形紙錠放置於培養皿中

6. 重複步驟5，直到四個紙錠皆放好 *五個紙錠等距放置，不可以太靠近邊緣*

7. 以pipetman分別加入無菌水、蒜頭萃取液、70%酒精、10%漂白水各10μl

8. 培養基正置於37〫C的培養箱中16小時

9. 隔天觀察結果