手電筒的白光經過DVD之後,因為繞射的緣故使的光分散成彩虹的顏色
吸光值 (ABS)
光經過底色管之後打到儀器上,儀器會將光訊號轉成電訊號,進而算吸光值
通透率 (T)=剩下的光 / 原光
ABS=-log(T)
ABS和吸收常數(E)、濃度(C)、光通過長度(L)有關
分光光度計
底色管cuvette *拿的時候拿上面,下方要讓光通過,避免留下指紋*
紅墨水
不同波長燈卡 *燈卡箭頭為光的行進方向*
藍紫色
藍色
綠色
橘色
紅色
暗紅色
使用裝滿2mL的cuvette校正
光強度調整至數值100後,按下Ref按鈕(紅色)
之後放入裝滿2mL紅墨水的cuvette,放好燈卡後按下Abs按鈕(黃色)
重複步驟1~3,觀察不同燈卡
⇒ 由此得知波長515nm的光吸收度最好,因此以下實驗以515nm的光進行
實驗步驟
使用裝滿2mL的cuvette校正
光強度調整至數值100後,按下Ref按鈕(紅色)
之後放入裝滿2mL紅墨水的cuvette,放好燈卡後按下Abs按鈕(黃色)
將紅墨水稀釋成1倍、2倍、4倍、8倍、16倍
重複步驟1~3,分別測量這些稀釋後紅墨水的Abs值
吸光值與墨水濃度大約成正比關係
迴歸直線方程式:y=0.0195x+0.0026
相關係數平方:0.9959
相關係數平方大於0.98,測量資料可信
如圖所見表中Abs與波長呈現山形曲線,峰值波長為530nm,Abs為0.346
菠菜0.05%、DCIP1mM 、DCMU0.5M蔗糖液、研缽、茶葉袋、Cuvette、光譜儀
搗碎菠菜
將菠菜泥放進茶葉袋,過濾分離葉綠體
稀釋葉綠體直到液體的吸光質介於0.4~0.6
加入 100µL DCIP並PIPETING *不然會因為密度不均而混和不均影響結果*
測量全黑590nm時的吸光值
重複前兩步,把手電筒緊貼在cuvette上方照射,每30秒紀錄一次吸光值
加入DCMU 100µL反應2分鐘,再加入DCIP 100µL ,接著持續每30秒紀錄一次吸光值。
加入DCIP後吸光值逐漸下降,證明DCIP有影響光合作用的進行。
加入DCMU後,吸光值沒有明顯變化,說明DCIP遭到DCMU抑制,進而阻斷光合作用的電子傳遞導致光合作用沒辦法進行。