QuantiFluor® ssDNA Systemを用いたcDNA濃度の測定

QuantiFluor® ssDNA System でcDNA濃度を測定し、これをqPCRで測定した遺伝子発現のノーマライザーとして用いる事が出来ます。

ssDNA（cDNA）濃度測定手順

1. 蛍光色素の希釈

TEバッファーを用いて、ssDNA染色液（Promega製）を200〜400倍に希釈する。

※cDNAを10倍希釈して使用する場合は、染色液の200倍希釈が推奨される。

2. 試料の分注

黒色マイクロプレートの各ウェルに100 µLの染色液を添加する。

3. 試料または標準品の添加

各ウェルに2〜10 µLの10倍希釈cDNAまたは標準品（25 ng/µLを起点に1/2系列で8段階＋ブランク）を添加する。

※10倍希釈cDNAを使用する場合、10 µLの添加が推奨される。

4. 反応時間

室温で5分間インキュベートする。

5. 蛍光測定

励起波長492 nm、蛍光波長582 nmで測定を行う。