微生物的培養與分離
材料與設備:
材料與設備:
(一)菌種:大腸桿菌(E.coli)
(二)器材:接種環、酒精燈、70%酒精、三角玻棒、燒杯
(三)試劑:95%酒精、37℃培養箱、LB固體培養基(Luria-Bertani agar)、LB培養液(Luria-Bertani broth)
方法:
方法:
(一)菌落懸浮法
- 以接種環挑取菌落置於LB培養液中
- 於37℃震盪培養箱內培養,隔天觀察細菌生長情形
(二)塗抹法(Spreading Method)
- 使用已滅菌之三角玻棒將菌液均勻塗抹在LB pLate上
- 於37℃培養箱內培養,隔天觀察菌落生長情形
(三)分區劃線法(Streaking Method)
- 以接種環挑取菌落,於LB plate上均勻劃開,第二次劃線需經過第一次所劃的線,第三次也是(需特別注意劃過前一條線時只需經過一條線即可,不然菌落沒辦法分離)
- 每次劃線前均須以酒精燈進行滅菌
- 培養隔夜後可得到分散之單一菌落(Single colony)
分區劃線法(原理就如同稀釋一樣,重複動作是為了將菌落分離,但是因為我們劃線時不小心經過太多次前一條的線所以導致菌落沒有分離的很好)
分區劃線法(原理就如同稀釋一樣,重複動作是為了將菌落分離,但是因為我們劃線時不小心經過太多次前一條的線所以導致菌落沒有分離的很好)
塗抹法
塗抹法
菌落懸浮法
菌落懸浮法