蛋白質電泳是一種常用的生物分析技術，它基於蛋白質在電場中的運動行為。這種方法可以根據蛋白質的大小、電荷和形狀將其分離和純化，進而進行定性和定量分析。

蛋白質電泳的原理基於蛋白質在電場中的電荷特性和運動速度差異。當一個蛋白質混合物被施加電場時，蛋白質分子會受到電場力的作用而遷移。這是因為蛋白質分子帶有正電荷、負電荷或兩者的組合，而在電場中會受到電場力的引導。

在蛋白質電泳中，最常用的方法是聚丙烯酰胺凝膠電泳（Polyacrylamide Gel Electrophoresis，簡稱PAGE）。在PAGE中，聚丙烯酰胺凝膠被用作固相介質，其孔隙大小可以控制蛋白質分子的遷移速度。注意，因為Acrylamide(丙烯醯胺)為神經毒劑，因此在實驗時務必戴上手套，並避免讓手接觸到聚丙烯酰胺凝膠。

當蛋白質樣品被加載到聚丙烯酰胺凝膠上後，一個電場被施加在凝膠中，通常是從一端到另一端。正電極會吸引帶負電荷的蛋白質，而負電極會吸引帶正電荷的蛋白質。由於不同蛋白質之間的電荷性質和大小差異，它們會以不同的速率移動。

當電場通過凝膠時，蛋白質會在凝膠中的孔隙中移動，並逐漸分離成多個蛋白質帶（bands）。較小的蛋白質通常會移動得更快，而較大的蛋白質則移動得更慢。這種分離是基於蛋白質的尺寸和形狀差異。

在電泳過程完成後，凝膠上的蛋白質帶可以被進一步觀察和分析。常見的方法是使用染色劑（如Coomassie藍染劑）將蛋白質帶著色，使其可見。此外，可以對蛋白質進行進一步的分析，例如質譜分析（Mass Spectrometry）以確定蛋白質的結構和特性。

蛋白質電泳利用蛋白質在電場中的電荷和尺寸差異，通過分離和移動速度的差異，將蛋白質分子分離成不同的帶，為我們研究蛋白質的結構和功能提供了重要的工具。

1.準備電泳槽

• 用酒精將短玻璃與長玻璃擦拭乾淨

• 使用ddH2O測試膠台是否會外漏後，用圖畫紙把水吸乾

2.製備與加入下膠

• 下膠配方:

  • H2O:4.6ml

  • 29% Acrylamide Mix:2.7ml

  • 1.5M Tris(pH 8.8):2.5ml

  • 10% SDS:100μl

  • 1% TCE(2,2,2-Trichloroethanol):100μl

  • TEMED:6μl

  • 10% Ammonium Persulfate(APS):100μl

• 加入下膠

  • 加入6.5ml下膠至兩片玻片之間，緩緩加入2-3ml水

  • 等待下膠凝固後，去除玻片之間的上層液體，準備加入上膠

3.製備與加入上膠

• 上膠配方:

  • H2O:3.4ml

  • 29% Acrylamide Mix:830μl

  • 1.0M Tris(pH 6.9):630μl

  • 10% SDS:50μl

  • TEMED:5μl

  • 10% Ammonium Persulfate(APS):50μl

• 加入上膠

  • 加入上膠至兩片玻片之間，並插入10wells尺梳

  • 等待上膠凝固後，小心取出整片膠