分子遺傳學實驗

　　　　　　　　　　　　　　指導教授：黃貞祥老師

壹、實驗課程簡介

早上與下午的課程中，我們體驗了聚合酶連鎖反應實驗以及限制酶核酸內切實驗，並且學習關於台灣畜牧業鴨子品種的知識，讓我們對於既陌生又熟悉的鴨子有更深入地了解。

貳、實驗樣本與器材

一、聚合酶連鎖反應

（一）材料

2XPowerpol MasteMix(150μL) 、ddH2O (300μL)、Duck DNA(Pekin, Mule, Muscovy 5μL each)

（二）工具

1.5 ml Eppendorf(2個)、八連PCR管 (1個)

（三）引子

CHD primer (Forward)、 CHD primer (Reverse)、CAUD006 primer (Forward)、CAUD006 primer (Reverse) 5μL each

二、限制酶核酸內切

（一）材料

2X Powerpol MasterMix(80μL)、ddH2O(300μL)、rCuSmart buffer(20μL)、Sma1 酵素

（二）工具

八連PCR管一個

（三）引子

Sma1 primer (Forward)、Sma1 primer (Reverse) 5μL each

參、實驗原理

一、聚合酶連鎖反應:

利用特定序列的DNA，在眾多的DNA分子中運用基因複製的原理，尋找是否有我們需要的目標基因並將其放大。【1】

二、限制酶核酸內切:

運用細菌的限制酶機制，使用限制酶將特定序列切割並插入我們想要的序列。【2】【3】

肆、實驗步驟

一、聚合酶連鎖反應

二、限制酶核酸內切

伍、實驗結果

將溶液加入瓊脂凝膠凍中

最終跑膠的結果

用冰塊保存的DNA試管

陸、實驗紀錄與檢討

這次實驗的過程中，我們進行得很順利，無論是加入PCR反應試劑、加入DNA或是將混合好的試劑加進瓊脂凝膠中，都沒有甚麼困難，但後來跑完膠後的結果卻與其他組不同。在經過教授的講解後，我們才發現原來是跑膠時膠的位置放反了，導致圖形與他組有所出入。這次的失誤讓我們了解到照著簡報上的圖形操作實驗也是非常重要的一環，即使最後結果能判斷出鴨子公母以及品種，但這依然是寶貴的經驗。

柒、參考資料來源

【1】https://webmail.life.nthu.edu.tw/~b851622/Biology/PCRWhat%5B1%5D.htm

【2】https://life.nthu.edu.tw/~lseduip/U-BET/ubet/F2/molecule.htm#6

【3】https://reurl.cc/nYn67D

Page updated

Report abuse