研究にあたり以下の重要な研究手法を用いています。
We employ the following key research methodologies in our work.
研究にあたり以下の重要な研究手法を用いています。
We employ the following key research methodologies in our work.
子宮内で発生中の胎仔の側脳室にプラスミドDNA溶液を注入し、電気パルスによって、神経細胞が産生される脳室帯に存在する神経幹細胞にプラスミドDNAを取り込ませる方法です。神経幹細胞に取り込まれたプラスミドDNAは、一定期間に誕生する神経細胞に引き継がれるために、神経細胞に様々な操作を行うことが出来ます。当研究室の田畑秀典先生と慶應義塾大学医学部解剖学教室の仲嶋一範教授によって開発され、世界中で広く使われています。
CRISPR/Cas9を用いたゲノム編集により、非常に簡単に遺伝子を破壊したノックアウトマウス(KO)やDNA配列の挿入を行うノックインマウス(KI)の作製が出来る様になりました。卵管内で直接ゲノム編集を行うことの出来るi-GONAD法を用いて、様々なゲノム編集マウスを作製して、大脳新皮質層形成過程の研究を行っています。
迅速なゲノム編集の検証等の為、受精卵を取り出してのゲノム編集も行っています。また、ゲノム編集を行った受精卵は卵管移植により産仔を得ることも出来ます。
胎生期や生後の脳の広範囲に渡る遺伝子導入にはadeno-associated virus(AAV)を用いています。大規模な遺伝子導入が可能となります。