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鴨子
鴨子
(圖片來源：維基百科、農業知識入口網)
北京鴨
和褐色菜鴨的共同祖先是綠頭鴨，但北京鴨是肉鴨；褐色菜鴨是蛋鴨。
番鴨
又稱為疣鼻棲鴨，原產地是南美洲，也是薑母鴨的原料。
土番鴨
公黑色番鴨和母褐色番鴨人工輔助受精後形成二品種黑色土番鴨；公北京鴨和母白色菜鴨受精後形成母改鴨，在和公白色番鴨受精形成三品種白色土番鴨。
聚合酶連鎖反應
聚合酶連鎖反應
材料：
2X Powerpol MasterMix: 150μL
ddH2O 300μL
Duck DNA:
Pekin, Mule, Muscovy 5μL each 1.5 ml Eppendorf 2個
八連 PCR 管1個
引子：
5μL CHD primer （Forward）
5μL CHD primer (Reverse)
5μL CAUD006 primer (Forward)
5μL CAUD006 primer (Reverse)
步驟：
取 Eppendorf ，加入 52.5μL ddH2O 和 62.5μL MasterMix
加入2.5μL CHD primer （Forward）、2.5μL CHD primer （Reverse）
取2.之混合液24μL 分別加入其中四個PCR管
重複步驟1.
將4.的Eppendorf加入2.5μL CAUD006 primer (Forward)、2.5μL CAUD006 primer （Reverse）
取5.之混合液24μL 分別加入另外四個PCR管
在PCR管中依照順序加入對應的DNA (NC為加入ddH2O的對照組)
進行PCR，循環如右圖所示
進行電泳分析
限制酶核酸內切
限制酶核酸內切
材料：
2X Powerpol MasterMix : 80 μl
ddH2O : 300 μl
rCutSmart buffer 20μl
Sma1 酵素: 請助教幫忙加入
八連 PCR 管 1 個
引子:
5μl Sma1 primer (Forward)
5μl Sma1 primer (Reverse)
步驟：
取 Eppendorf ，加入 52.5μL ddH2O 和 52.5μL MasterMix
加入2.5μL Sma1 primer (Forward)、2.5μL Sma1 primer (Reverse)
取2.之混合液24μL 分別加入其中四個PCR管
在PCR管中依照順序加入對應的DNA (NC為加入ddH2O的對照組)
進行PCR，循環同前一實驗所示
取PCR產物各20μL，分別加入另外4個PCR管
分別加入5μL rCutSmart buffer、24μL ddH2O
助教協助分別加入1μL Sma1 enzyme
再次進行PCR，溫度時常如右下圖所示
進行電泳分析
實驗結果
實驗結果
圖片由左至右分別為:pekin uncut、mule uncut、musc uncut、negative contorl uncut、marker、pekin cut 、mule cut 、musc cut 、negative contorl cut。從圖中可以看出，除了marker其他well都沒有肉眼可可見的條帶，與negative contorl 相同。可以推論，PCR應該有出問題，造成DNA片段無法擴增。推論其原因可能為primer出問題或PCR 機器有狀況。
心得
心得
在課程中，我們學習PCR的操作，包含加入DNA、buffer、primer......，再加上精準醫學與生醫檢測中我們學到如何抽取DNA。我們在營隊中最後學到了從抽DNA到PCR的全過程，這是相當不簡單的。雖然我們最後的實驗失敗了，但應該不是我們操作上的失誤，而是其他原因。因為其他三組也沒有做出來。這讓我們思考失敗的原因，是primer設計有問題?PCR machine 壞掉?還是DNA樣品有問題?若時間充足，我們應該再做幾次實驗，依次排除問題，找出失敗的原因，否則下次再做相同的實驗依舊會失敗。
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