Patogenicidade de isolado fúngico pela aplicação de disco de micélio

Folhas sadias do terço médio de plantas adultas de xxxx cv. xxxx foram lavadas em água corrente e deixadas para secagem em câmara de fluxo laminar por 10 minutos (CARVALHO et al., 2008). Em seguida, foram realizados cinco furos do lado esquerdo e cinco do lado direito do limbo foliar com auxílio de uma agulha esterilizada e, posteriormente, depositado um disco (5 mm Ø), contendo micélio do fungo com 7 dias de crescimento, sobre os furos. As folhas inoculadas serão adicionadas em condições de câmara úmida em caixas acrílicas transparentes do tipo gerbox (11 x 11 cm), contendo duas folhas de papel de mata-borrão com manutenção de umidade apenas no papel e, posteriormente, levadas para câmara de germinação do tipo BOD a 25°C e fotoperíodo de 12 horas. O delineamento será o inteiramente casualizado (DIC), com seis folhas de xxxx por isolado de xxxx, sendo uma folha/gerbox. As avaliações da severidade da doença serão realizadas aos 4, 6, 8 e 10 dias após a inoculação (DAI), medindo-se o diâmetro (mm) das lesões com auxílio de paquímetro (média de duas medidas diametralmente opostas). A área foliar lesionada aos 10 DAI será obtida pela fórmula: A = π (d1 × d2)/4. O delineamento utilizado será o inteiramente casualizado (DIC), com cinco repetições (gerbox) por isolado de xxxx. O controle consistirá na aplicação de 25 μL de água destilada esterilizada (ADE) na região dos orifícios feitos no limbo foliar (SILVA et al., 2022).

Patogenicidade de isolado fúngico pela aplicação de suspensão de esporos

Folhas sadias do terço médio de plantas adultas de xxxx cv. xxxx foram lavadas em água corrente e deixadas para secagem em câmara de fluxo laminar por 10 minutos (CARVALHO et al., 2008). Em seguida, foram realizados cinco furos do lado esquerdo e cinco do lado direito do limbo foliar com auxílio de uma agulha esterilizada e, posteriormente, 25 μL de suspensão micelial de xxxx será aplicada na região contendo os cinco furos. A suspensão será obtida pela adição de 10 mL de água destilada esterilizada (ADE) em placa contendo colônias esporuladas do fungo com 7 dias de idade. As folhas inoculadas foram adicionadas em condições de câmara úmida em caixas acrílicas transparentes do tipo gerbox (11 x 11 cm), contendo duas folhas de papel de mata-borrão com manutenção de umidade apenas no papel e, posteriormente, levadas para câmara de germinação do tipo BOD a 25°C e fotoperíodo de 12 horas. O delineamento será o inteiramente casualizado (DIC), com seis folhas de xxxx por isolado de xxxx, sendo uma folha/gerbox. As avaliações da severidade da doença serão realizadas aos 4, 6, 8 e 10 dias após a inoculação (DAI), medindo-se o diâmetro (mm) das lesões com auxílio de paquímetro (média de duas medidas diametralmente opostas). A área foliar lesionada aos 10 DAI será obtida pela fórmula: A = π (d1 × d2)/4. O delineamento utilizado será o inteiramente casualizado (DIC), com cinco repetições (gerbox) por isolado de xxxx. O controle consistirá na aplicação de 25 μL de ADE na região dos orifícios feitos no limbo foliar (SILVA et al., 2022).

Análises estatísticas

Os resultados serão submetidos ao teste de Kolmogorov-Smirnov para verificar a normalidade dos dados e, posteriormente, a análise de variância (ANOVA), ao teste de Scott-Knott (P<0,05) e à análise de regressão para obtenção de modelos ajustados ao desenvolvimento de lesões. Todas as análises serão realizadas com auxílio do programa SISVAR 5.3 (FERREIRA, 2011). A severidade será calculada como a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD), utilizando a fórmula AACPD = Σ{[(y1 + y2)/2] × (t2 − t1)}, onde, y1 e y2 são duas avaliações consecutivas realizadas nos tempos t1 e t2, respectivamente.

Referências

CARVALHO, D.D.C.; ALVES, E.; BATISTA, T.R.S.; CAMARGOS, R.B.; LOPES, E.A.G.L. Comparison of methodologies for conidia production by Alternaria alternata from citrus. Brazilian Journal of Microbiology, 39(4), 792-798, 2008. https://doi.org/10.1590/S1517-83822008000400036

FERREIRA, D.F. Sisvar: a computer statistical analysis system. Ciência e agrotecnologia, 35, 1039-1042, 2011. https://doi.org/10.1590/S1413-70542011000600001

SILVA, L.R.; MARQUES, M.G.; DIANESE, E.C.; RODRIGUES, F.; OLIVEIRA, T.A.S.; DUARTE, E.A.A.; SANTOS, S.X.; CARVALHO, D.D.C. Pathogenic characterization of Pestalotiopsis grandis-urophylla isolates using mycelial suspension. Journal of Agricultural Science, 14(9), 65-70, 2022. https://doi.org/10.5539/jas.v14n9p65