原理: NMR多維光譜運用在蛋白質化學,利用沒有電阻的導線產生強大的磁場,造成原子共振,具有不同化學環境的原子核在磁場中有不同的共振頻率, 在強磁場中,某些元素的原子核和電子能量本身所具有的磁性,被分裂成兩個或兩個以上量子化的能級。在磁場中,帶核磁性的分子或原子核吸收從低能態向高能態躍遷的兩個能級差的能量,會產生共振譜,可用於測定分子中某些原子的數目、類型和相對位置。
NMR常用來檢測胺基酸結構,1D光譜可觀測訊號,2D光譜可測量兩個訊號間的關係,有TOCSY、NOESY兩種,TOCSY用來測量鍵結關係,得到的訊號必需是三個鍵以內的鍵結,NOESY測量的是距離關係,NOESY訊號來自距離小於5Å 內的氫原子對。將TOCSY、NOESY兩個光譜疊合,就可進行光譜鑑定。
由顏色深淺區別NOESY和TOCSY,由兩個重疊的點開始可判斷出是胺基酸間的訊號,在上下左右依序將序列連結起來。