畫線法:以滅菌接種環挑取大腸桿菌單一菌落，將大腸桿菌稀釋菌液低於LB Plate上，取三角玻棒菌液低於LB Plate上，取三角玻纖至於95%酒精溶液燒杯中，取出過火使酒精燒盡，冷卻後，右手持玻棒混勻菌液，左手則旋轉LB Plate，將菌液均勻分布於LB Plate上。將菌盤倒放，至於37度c培養箱內培養。

塗抹法:以滅菌接種環挑取大腸桿菌單一菌落，於LB Plate上延平行線將菌落劃開，此為第一區。將接種環以酒精燒紅，殺死上面沾有隻細菌，冷卻後在劃過之第一區內，沾取少部分之菌落，將plate輕轉90度，一以平行線劃開，此為第二區。依同法再由第二區畫出第三區，最後一曲劃線時，線條盡量拉開，不可太過密集。將菌盤倒放，至於37度c培養箱內培養。