精準醫療 Precision Medicine

根據個體差異(snp)，施以個人化的醫療措施。例如:將腫瘤細胞進行基因定序，分析，對病患對症下藥。同時，預測疾病風險，將低患病機率。

人類基因計畫 Human Genome Project

人類基因體的定序以「人類基因體計畫」為名正式開始於1990年，此計畫是由大學研究機構的科學家們在跨國性政府資助下成立，總共涉及6個國家的20家大型定序中心以及著力於一些小型計畫的其他實驗群。

在人類基因體定序於2003年大致完成之後，每一染色體的序列被仔細分析並描述於一系列的論文。

本次課程實驗為DNA萃取與qPCR及酒精代謝檢測。 

• 口腔棉棒

• Eppendorf

• 室溫PBS

• Proteinase K

• Lysis Buffer

• 100%EtOH

• Spin Column

• GW Buffer

• Wash Buffer

• Elution Buffer

SYBR Green I是與雙股DNA的minor groove結合釋放出螢光,因此在PCR過程中可在每一cycle的extension步驟結束時測量螢光的強弱,就可知每PCR cycle中產生了多少PCR product。

Sample Preparation

1. 取1個Eppendorf，加入1 ml PBS備用。

2. 使用1支口腔棉棒，分別刮取兩側臉頰內口腔黏膜。

3. 浸入PBS中用力攪拌30秒以上 → 取出丟棄。

4. 離心：5000g；5min。

5. 抽除上清液（保留沉澱細胞）

6. 以200μl PBS將沉澱細胞重新懸浮。

Lysis

7. 加入20μl Proteinase K

8. 加入200μl BG Buffer 混合均勻

9. 放入60°C 乾浴中15min → 離心把蓋子上的液體去除（期間每４分鐘vortex混合均勻一次）

DNA Binding

10. 加入200μl 100% EtOH混合均勻

11. 將所有Eppendorf中的液體移入Spin Column

12. 離心：6000g；1min

13. 抽除廢液

Wash

14. 加入400μl Wash Buffer 1

15. 離心：16000g；1min → 抽除廢液

16. 加入750μl Wash Buffer 2

17. 離心：16000g；1min → 抽除廢液

18. 離心：16000g；3min → 將Spin Column套入新的Eppendorf中

DNA Elution

19. 加入50μl Elution Buffer→放入離心機靜置3min

20. 離心：16000g；2min

21. 將處理好的樣品拿去做PCR，加入40X custom SNP ASSAYS

• 上課講義

• https://sites.google.com/stu.cchs.chc.edu.tw/2025ntfu-

• summercamp1/%E7%B2%BE%E6%BA%96%E9%86%AB%E7%99%82