Microbiology

用中性染量的稀釋液，滲透死細胞進行染色，可用於觀察細菌基本外型、菌體排列狀態、菌體成分分析。

右圖為簡單染色後的大腸桿菌。

桿菌呈紫色。

利用苯胺黑（Nigrosin） 對背景染色，以凸顯細胞。

右圖為負染色後的大腸桿菌細胞。

背景成粉紫色，桿菌呈透明。

染色步驟以四種溶液-結晶紫、碘液 (媒染劑)、乙醇 (脫色劑) 及沙番紅處理。

此實驗利用僅存於革蘭式陽性菌體的核醣核酸美鹽-蛋白質-醣類複合物 (Mg ribonucleic acid-protein-carbohydrate complex) 與染劑間的作用，此複合物會與染劑中的結晶紫及碘分子形成一種無法被酒精及水溶解的物質。可將細胞分為革蘭氏陽性與革蘭氏陰性 :

革蘭式陽性 (Gram-postitive)

細胞壁有一層較厚的胜肽聚糖 ，所含脂質較少，染色步驟中以乙醇脫色處理時，細胞壁會形成脫水現象，滲透降低，使結晶紫-碘的複合物流於細胞質中無法溶出。

革蘭氏陰性 (Gram-negative)

細胞壁富含脂蛋白和脂多醣，且胜肽聚醣層較薄，使用乙醇處理脫色時，會將細胞壁的脂質溶解，使壁的空隙變大，滲透性增加，很快溶出結晶紫-碘複合物。

乙醇脫水之後，加入沙番紅，使革蘭氏陰性菌呈粉色。