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Funcionamiento
Funcionamiento
El sistema del microscopio de campo oscuro es una modificación al sistema de campo claro.
El sistema del microscopio de campo oscuro es una modificación al sistema de campo claro.
En lugar de un diafragma de tipo iris, se instala un diafragma de campo oscuro (disco opaco) en el microscopio. Este dispositivo impide que los rayos centrales de luz que salen del condensador incidan directamente en la preparación, permitiendo que solo incidan en ella rayos de luz que llegan a la preparación de manera oblicua. De este modo dichos objetos aparecen brillantes sobre un fondo oscuro.
En lugar de un diafragma de tipo iris, se instala un diafragma de campo oscuro (disco opaco) en el microscopio. Este dispositivo impide que los rayos centrales de luz que salen del condensador incidan directamente en la preparación, permitiendo que solo incidan en ella rayos de luz que llegan a la preparación de manera oblicua. De este modo dichos objetos aparecen brillantes sobre un fondo oscuro.
Configuración esquemática del principio de iluminación de campo oscuro (luz transmitida). El filtro opaco es de forma circular y forma un cono de luz vacío que incide sobre el espécimen en forma oblicua y los rayos refractados, difractados y reflejados por el espécimen penetran en el sistema óptico del microscopio para formar la imagen.
Configuración esquemática del principio de iluminación de campo oscuro (luz transmitida). El filtro opaco es de forma circular y forma un cono de luz vacío que incide sobre el espécimen en forma oblicua y los rayos refractados, difractados y reflejados por el espécimen penetran en el sistema óptico del microscopio para formar la imagen.
APLICACIONES DEL MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
APLICACIONES DEL MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
• Estudio de especímenes de tamaño pequeño no coloreados, tales como microorganismos acuáticos, ovocitos, células en cultivo
• Observación de células móviles, como el Treponema Pallidum, una espiroqueta causante de la sífilis, la cual con la microscopía óptica ordinaria es muy difícil de visualizar.
• Estudio de procesos fisiológicos como mitosis y migración celular
“De manera similar a un cielo nocturno en el cual brillan las estrellas o al iluminar con una linterna un cuarto oscuro y las partículas de polvo flotantes en el aire se tornan visibles porque reflejan o difractan la luz, los especímenes observados al microscopio de campo oscuro se ven blancos y brillantes sobre un fondo oscuro”
VENTAJAS
VENTAJAS
Permite ver partículas dispersas en un medio homogéneo
Hace posible la observación del movimiento Browniano de las partículas
Se puede utilizar para la observación de preparaciones sin colorear.
Visualiza los bordes desatacados de las muestras.
Técnica valiosa para observar microorganismos de tipo Treponema Pallidum, espiroquetas con diámetros superior a 0.2um.
Se pueden observar células y microorganismos vivos que no son observables con el microscopio de campo brillante debido a la falta de contraste.
DESVENTAJAS
DESVENTAJAS
Inadecuada preparación de la muestra.
Difícil acceso al microscopio que posea el condensador especial por su alto costo.
No deja visualizar estructuras celulares específicas, solo bordes de células o partículas.
Dado que la imagen solo se forma con la luz difractada, siempre más débil que la luz directa deben formarse fuentes lumínicas muy intensas, lo que no siempre es fácil sobre todo cuando los objetos son vivos y, por consiguiente, sensibles a fuertes iluminaciones.
Diferencias según tipo de Iluminación
Diferencias según tipo de Iluminación
Micrografías de la superficie de una hoja que muestran diferencias de contraste entre los diversos tipos de iluminación.
En la parte inferior se aprecia el tipo de filtro empleado, en campo claro (derecha) el haz de luz pasa sin interrupción.
En campo oscuro, aún muchos detalles más pequeños son visibles.
En iluminación oblicua se obtiene contraste con relieve. En campo claro el contraste es limitado
ABRE AQUÍ PARA UN RETO:
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Arma un ROMPECABEZAS de una fotografía tomada con un MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
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BIBLIOGRAFÍA
1. revista.ciencias@ciencias.unam.mx
2. Karp Gerard. Biología Celular y Molecular, 2 edición McGraw Hill. México 1991. Pag 864-867, 870-871.
3. Guzman U. Miguel A. Sífilis Diagnostico y Manejo Serològico. 2 Edición Instituto Nacional de salud. Santafè de Bogotá 1979. Pag 83-86.
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7. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Diagnóstico de leptospirosis de muestras de sangre y cultivo por observación en microscopio de campo oscuro. Biomédicas. 2008; 28 (1): 7-9. Available from: scielo.org
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9. http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo6_1.htm
10. Modificada a partir de Wegerhoff, R., Weildich, O., Kassens, M. (2005). Basis of light microscopy image. Darmstadt: GIT VERLAG GmbH & Co. KG (51)
11. Modificado de Wim van Egmond (2002). 'Easy to make' contrast enhancement filters for the microscope dark-field, oblique and Rheinberg illumination (96).
12. https://www.ecured.cu/Microscopio_de_campo_oscuro
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