ESTRATEGIAS DE CRIOPRESERVACIÓN DE SEMEN DEL LENGUADO PARALICHTHYS ORBIGNYANUS

Zalazar, L.¹, Ledesma, A²., García, M. L.¹, Greco M.¹, Radonic, M.³, López, A.³, Aristizabal, E.³, Cesari, A.¹

¹Instituto de Investigaciones Biológicas, FCEyN-UNMdP, CONICET, Mar del Plata

²Laboratorio de Reproducción, INTA-Balcarce, CONICET

³Estación de Maricultura y Biología experimental, INIDEP-Mar del Plata

zalazar@mdp.edu.ar

En Argentina existe interés en impulsar la acuicultura/maricultura y programas para mejorar características de especies cultivables, sin embargo, la biotecnología de crio-preservar gametas de peces tiene escaso desarrollo. El objetivo fue optimizar protocolos de congelación del semen de Paralichthys orbignyanus necesarios para generar crio-bancos de gametas. Se colectó semen de reproductores criados en cautiverio y se crio-preservaron muestras con buena calidad a través de 2 técnicas: vitrificación o descenso lento de temperatura (a 1*10⁸ o 1*10⁹cél/ml). Para este último, se emplearon medios conteniendo 12% glicerol o 10% DMSO. La motilidad espermática del semen descongelado se activó mediante agua salina sintética e inmediatamente se monitoreó la motilidad durante 10 min por video-microscopia. Se analizó empleando un CASA libre desarrollado por el laboratorio. Se observó que los espermatozoides congelados a 1*10⁹cel/ml en el medio con 12% glicerol mostraron mayor porcentaje poblacional de espermatozoides motiles, motiles progresivos y mejores velocidades (VCL, VSL, VAP) alcanzadas tras descongelarse e inmediatamente activarse (T₀) respecto de aquellos congelados en medio con DMSO o vitrificados. Así mismo, no se encontraron diferencias entre estos dos últimos métodos. Las muestras congeladas a 1*10⁸cel/ml por descenso lento de temperatura mostraron mejores velocidades, así como mayores porcentajes de motiles y motiles progresivos respecto de la vitrificación. Tras 10 min de activación de la motilidad, se observaron resultados similares. Estos resultados contribuyen a generar un medio de crio-preservación de semen con potencial de ser usado para el cultivo del lenguado.

Palabras clave: SEMEN, MOTILIDAD ESPERMáTICA, CRIOPRESERVACIÓN, LENGUADO