Presentación Oral
DESARROLLO DE PROTOCOLOS DE ENFRIAMIENTO DE EMBRIONES DE PEZ BETA (BETTA SPLENDENS)
Macoretta, C.1, Seoane Rocha, C.2, Miranda, L.1
1Laboratorio de Ictiofisiología y Acuicultura, INTECH, CONICET-UNSAM
2Laboratorio de Biología del Desarrollo, INTECH, CONICET-UNSAM
El pez beta (Betta splendens) es uno de los peces ornamentales más vendidos en el mundo y se encuentra entre las especies más importadas a la Argentina. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un protocolo de enfriamiento para embriones de pez beta, esencial para su traslado durante un tiempo prolongado. Se utilizaron embriones obtenidos a partir de desoves en las instalaciones del INTECH. Se optimizó su incubación en placa, sin cuidado parental, y se estableció el estadio que mejor toleraba la manipulación. Se separaron manualmente del nido de burbujas y se realizaron pruebas de toxicidad y enfriamiento con una solución utilizada previamente en Cipriniformes (S1: Sacarosa 17,1% g/l, Metanol 4,8% v/v), diluciones de esa solución (S2: S1/2; S3: S1/4) y agua. Embriones con vesículas ópticas no pigmentadas (24hpf, 26°C, n=10) fueron colocados en placas multiwell con 10ml de las soluciones antes mencionadas, por triplicado y enfriados a razón de -0,516°C/min. Luego, se almacenaron a 3 temperaturas distintas: durante 3, 6, 9, 12, 15 y 24h a 5°C y, durante 24 y 48h a 10 y 14°C. Posteriormente, se les realizaron 5 lavados con 5ml de agua y se los incubó a 26°C, 12hL:12hO. Se evaluó la eclosión, la presencia de malformaciones y la viabilidad de las larvas obtenidas. La S1 resultó tóxica para los embriones. Estos toleraron hasta 24h a 10°C y 48h a 14°C en agua. Asimismo, aquellos almacenados durante 9h a 5°C presentaron una eclosión del 65-84%, con una proporción de larvas normales del 28-46% (no se hallaron diferencias significativas entre S2, S3 y agua). Sin embargo, la S2 resultó ser la más conveniente para el almacenamiento durante 12 y 15h, con 28% y 21% de eclosión, y una proporción de malformaciones leves (aspecto normal y dificultad para nadar) del 50 y 25%, respectivamente. Este trabajo demuestra que es posible el enfriamiento de embriones y sienta las bases para futuros ensayos en el área.
Palabras clave: ENFRIAMIENTO, EMBRIONES, PECES ORNAMENTALES, CRIOPROTECTORES, TOXICIDAD