病理採樣技術簡介

簡介組織病理採樣技術

撰文/鄭謙仁 教授

　　當臨床獸醫師已判斷出其病例的可能疾病或病變器官，此時若能有適當的採樣，並經組織病理檢查，此檢驗結果對於疾病的診斷或治療將有極大的幫助。而若病例不幸死亡，病理檢查結果亦能提供可能的死因，此資訊不只對認識疾病有所幫助，且對於未來類似疾病的診療亦有極大的助益。雖然病理檢查可辨識組織的病變，並將此資訊通知醫療人員以提供對「症」下藥的方法，但若無臨床醫師的密切配合，這樣的目的是永遠無法達到的。而一位獸醫病理師最害怕遇到的，是所收到的送檢病材，其包涵的資訊有所短缺，不足以提供適當的診斷，其不僅耽誤診療工作的進行，有時因無法挽救或補救的錯誤，而永遠無法知道病畜的病因或死因。

　　本次的簡介，希望由此提供臨床獸醫師在進行生檢或屍解採樣時，避免一些常見錯誤，使得送檢病材經病理診斷工作所得的資訊，能適時的提供各位在診療上最好的協助。

　　就生檢（Biopsy）病材，病理醫師最害怕的，是收到的樣材有下列情況：

1. 沒有病歷，或病歷不夠完整。
   　　有時如無頭公案或描述不清楚，不知道從哪裡切下及病畜疾病的狀況等。

2. 病材採樣不當。
   
   　　送檢的樣材不是太小塊或是找不到；或是切下來的地方皆是壞死區域或炎症反應區，或是切的病灶太過老舊等，以致於無法辨識病因的特徵；或是腫瘤病灶沒有適當的邊緣區域，而無法提供恰當的預後資訊。

3. 病材保存不當。
   　　送檢的病材已冷凍，或經不適當的固定；包括組織無切割致固定不良，或不適當的固定液；或處理不恰當而破壞組織的原貌等。上述的錯誤皆會干擾甚至摧毀了病變的特徵而無法診斷。

因此適當生檢樣材的檢送應注意到：

1. 詳細的病歷資料。
   
   　　這包括動物發病或病變(如腫塊)的病例，應詳細描述送檢臟器，其結構、大小、重量、形狀及顏色等。（可參考本系及動物醫院的生檢送檢單，填寫時應盡量完整。）

2. 適當的樣品採樣。
   　　以皮膚為例，病變應選取原發的病變為主，如丘疹（Papule）、膿皰（Pustule）、水痘（Bullae）、結節（Nodule）、剝落或脫落（Scaling）、紅斑（Erythema）、脫毛（Alopecia）、色素消退（Dipigmentation）。二次性病變，如痂皮（Crust）、潰瘍（ulcer），或因原發病變所引起的創傷或其他二次性病原感染的病灶應避免。二次性病變發生因無法提供正確的病變特徵或病因，對於治療工作助益不大。而原發的病變應以新的及最近的較好，因此尚需配合畜主的描述及觀察以進行採樣。有時皮膚的樣材只給表面（如表皮epidermis），而無接壤的真皮區，如此對於疾病的診斷是無法進行的。
   
   　　對於疑似腫瘤的病材，臨床獸醫師至少希望得到三種資訊，包括何種腫瘤、有切乾淨否、是否有轉移的傾向等。因此送檢的病材應盡量完整，且病材邊緣的部位較深層的部分重要。因此區域較無出血壞死，固定可能較好，及帶有腫瘤組織是否包覆完整或無包覆，或已局部擴散等重要資訊。另外手術是否將腫瘤部位切除乾淨，也是以送檢病材的邊緣區域來判斷。而疑似腫瘤病歷的局部淋巴結摘除及一併送檢亦是好習慣，一般不會因此而多收費，但卻有較多的資訊獲得，對於送檢醫師何樂而不為。

3. 病材的固定及運送。
   　　在此僅討論組織病理檢查的部分，其他螢光免疫染色等檢查之送檢組織之處理將不在此討論。組織病理檢查採下的組織應即時固定，千萬不要冰凍。固定液以10％中性福馬林對各位的狀況最方便，取得較易及便宜。而何謂10％中性福馬林？其配方包括：
   
   37-40％　　（福馬林原液）　　　100 mL
   
   dd H2O　　　　（水）　　　　　900 mL
   Na2HPO4　　（磷酸氫鈉）　　　4.0 gm
   Na2H2PO4　（磷酸二氫鈉）　　　6.5 gm
   福馬林的穿透力約為1mm/hr，因此固定的組織應不超過5mm其效果較好，組織太厚，應給予適當的切割，組織和固定液的比例至少為1：10。若沒有10％中性福馬林可資使用時，100％的絕對酒精可以應急，但其穿透力較差，因此組織厚度應不超過2mm。由於絕對酒精固定會使組織變硬，在後續處理上較不方便，因此較不鼓勵使用。另外在切割及處理病材時，不能壓迫及擠壓送檢組織，因其會造成人工干擾，而影響及造成判讀上的困難。

對於需要屍解或解剖病理檢查的病材時，我們最害怕遇到的事包括：

1. 沒有病歷。臨床獸醫師沒有或提供不完整的病例，要病理師上山下海去找動物的死因。

2. 不適當的樣材保存，包括冰凍或病材已腐敗。臨床工作非常的繁忙，獸醫師常在做完事後再來看或處理，或遇到假日，或遇到下班，或病材在戶外或室溫太久，致死後變化嚴重。

3. 郵寄剖檢後的組織，常遇到的狀況為組織太厚，固定不好，或臨床獸醫師只送他有興趣、或認為有病變的組織。經常因送檢臟器的不完整致診斷上無法有完整的答案。

因此，臨床獸醫師若需要自行剖檢及採取病材以送檢時，請注意下列事項：

1. 檢附此患畜所有的病例及檢驗報告。

2. 若自行剖檢時，請描述所看到的病變，但請勿判讀病變。例如肺的暗紅及堅實區域包括雙側尖葉，心葉及部分膈葉，但請勿用肺炎來描述，因篇幅的關係，描述方法請參考列述的文獻。

3. 採樣除了有病變的組織外，應包括下列器官：如心、肺、肝、脾、腎、腎上腺、甲狀腺、淋巴結、扁桃腺、舌頭、食道、胃、十二指腸、空腸、迴腸、大腸及腦（大腦、小腦及腦幹）。因篇幅的關係，亦請參考文獻1及3的解剖要領，了解一般的解剖程序。

4. 採樣除病變區外，亦包含部分的邊緣正常組織。

5. 採樣固定時應同生檢的原則一樣，以10%中性福馬林為固定液，病材不超過0.5公分厚，且組織和固定液的比例至少要1：10。

6. 若需要其他的檢驗，包括微生物培養，中毒分析等，應將這些目的所需的樣材先收集，另行保存，再進行組織病理的採樣。

7. 若有疑問，可事先請教本系及動物醫院的輪值病理醫師。

參考文獻

1. 邱慧英、張文發、劉振軒、李安興、劉錫光。野生動物的病理檢查。引自野生動物疾病與病理學圖譜，台灣養豬科學研究所編印，竹南，1-16，2000。

2. 劉振軒、何逸儒、祝平次、王琇真。組織病理染色技術與圖鑑。台灣養豬科學研究所編印，竹南，16-18，1996。

3. Gross TL, Ihrke PJ, Walder EJ, Introduction, the skin biopsy. In: Gross TL, Ihrke PJ, Walder EJ ed, Veterinary Dermatopathology. Mosby-Year Book Inc, St. Louis, Missouri, 1- 8, 1992

4. King JM, Dodd DC, Roth L, Newsun ME, The Necropsy book, Charles Louis Davis, DVM Foundation Gurnee, Illinois,21-56, 1998。

5. Rosai F. Ackerman’s Surgical Pathology, Mosby-Year Book Inc, St. Luis, Missouri, 1-29, 1995。