Mitybinės terpės mikroorganizmams auginti

Mitybinės terpės gali būti skurdžios arba turtingos. Skurdžiose terpėse mikroorganizmai auga lėčiau, tačiau mažesnė tikimybė tokia terpę užteršti pašaliniais mikroorganizmais. Turtingose maitinimo terpėse mikroorganizmai auga greičiau, tačiau yra labai didelė tikimybė tokią terpę užteršti nepageidaujamais mikroorganizmais iš išorės. Auginant mikroorganizmus iš biopreparatų geriausia naudoti skurdžias maitinimo terpes. Tiktai išgryninus (turint visiškai švarų mikroorganizmą) galima naudoti turtingas maitinimo terpes. Turtingos maitinimo terpės naudojamos, kai norime pasidauginti daug ir greitai. 

1. Paprasčiausia mitybinė terpė (universali) (Youtube - Иван Русских - 2023-06-27) 

Receptas:

1. Vanduo - 1L

2. Geltonas KRISTALON - 12g (nuo1 iki 20g galima)

3. Cukrus - 20g (nuo 10 iki 40g galima)

4. Valgomoji druska - 0,5g (nuo 0,2 iki 2g)

5. Virti 20 min

6. Atvėsus įnešti 20ml biopreparato (1 valg. šaukštas)

7. Su aeracija auginama 48 val., su chlorele - 72 val., pamaišant (suplakant) - 5 dienos

8. Naudojama atskiedžiant 1:100 laistymui ir apipurškiant

9. Saugojimas šaldytuve (3 - 5 laipsniai) iki 1 metų

Papildomai galimi priedai

1. Nistatinas (fungicidas) 1 tabletė ant 1 - 10 L vandens (1 tabletė ant 10 L vandens mieles sustabdo, o 1 tabletė ant 1L vandens mieles sunaikina).

2. Pomidorų pasta nuo 1 arbatinio iki 1 valgomojo šaukšto ant 1L vandens (naudoti tik profesionalams nes gali užaugti bet kas tik ne tas kas reikia)

3. Mielių autolizatas. Atskiesti su vandeniu 50/50 ir palikti 48 valandoms prie 35-45C temperatūros. Dedama 1 valgomasis šaukštas ant 1L vandens

4. Flukanazolas (50mg ant 1-5 L vandens). Naudojamas vietoje Nistatino

Kitos mitybinė terpės (populiarios)

2. Universalus druskų tirpalas maitinimo terpei paruošti (Иван Русских)

Papildomi priedai nulemia vieno ar kito organizmo augimą

Priedai:

1. Kaip energijos šaltinį naudoti 20g/1L: gliukozė, fruktozė, sacharozė (cukrus), krakmolas arba gliceriną 10g/1L. Universaliausia naudoti cukrų

2. Mikroorganizmų augimo akseleratoriai: mielės 10g/1L, pomidorų pastą 0,5a.š./1L + kreida 0,5a.š./1L (kreida jei auginate bakterijas)

3. Antibiotikai 0,5 tab./1L. Naudojama kai auginame grybus ir mūsų mikroorganizmas užterštas arba yra labai tikimybė užteršti maitinimo tirpalą bakterijomis. Antibiotikų tabletė susmulkinama ir užpilama 1 a.š. spirito. Tirpalas supilamas į jau paruoštą maitinimo terpę, kaip maitinimo terpės temperatūra nukrinta iki 60°C (Lietuvoje receptinis vaistas)

4. Fungicidai 1tab./1L. Naudojama kai auginame bakterijas ir yra didelė tikimybė užkrėsti maitinimo tirpalą grybais (dažniausiai mieliu). Fungicido tabletė susmulkinama ir užpilama 1 a.š. spirito. Tirpalas supilamas į jau paruoštą maitinimo terpę, kaip maitinimo terpės temperatūra nukrinta iki 60°C (Lietuvoje receptinis vaistas)

Pastaba. Paruoštą maitinimo terpę reikia virinti 20 min.

3 Skurdi maitinimo terpė grybams “Čapek“ (СРЕДА “ЧАПЕКА“) 

Pastaba. Paruoštą maitinimo terpę reikia virinti 20 min.

4. Turtingų maitinimo terpių natūralūs priedai

Vietoje druskų tirpalo arba papildomai galima naudoti:

• Bulvių nuovirą: 200g/1L supjaustytų kubeliais bulvių su lupena virti 30 min pasūdyti 2g druskos (be jodo). Nuovirą nusipilti ir sudėti likusius komponentus

• Žirnių nuovirą

• Daržovių nuoviras

• Vištienos krūtinėlės (be riebalų) nuoviras. Puikiai tinka kai kurių bakterijų auginimui.

• Makaronų nuoviras

• Atraskite eksperimento būdu ir savo nuovirą.

5. Druskų tirpalo pakaitalai

• Druskų terpę galima pakeisti trąšomis gėlėms (geriausia žydinčioms gėlės, ten daugiau fosforo), svarbu, kad trąšose nebūtų amonio ir humatų. Kiekis pagal instrukciją ant pakuotės. Papildomai reikia įdėti NCl (valgomosios druskos) 2g/lL.

• Puikus druskų pakaitalas yra trąšos Kristalon “geltonas“ N-P-K – 13-40-13 (Azotas-Fosforas-Kalis). Reikalingas kiekis 1g/1L. Papildomai reikia įdėti NCl (valgomosios druskos) 2g/lL.

6. Maitinimo terpė Ešbi (rus. Эшби)(eng. Ashby’s Glucose Agar) skitra gauginti azotą fiksuojančias bakterijas 

Pastaba. Paruoštą maitinimo terpę reikia virinti 20 min.

Maitinimo terpės grybų auginimui paruošimas:

1. Nulupkite bulvę, supjaustykite kubeliais ir virkite 1 L vandens 30 min. Vėliau vandenį nusunkite per sietelį.

2. Įdėkite į bulvių nuovirą mieles ir virkite dar 15-20 min

3. Į paruoštą tirpalą supilkite: trąšas, gliukozę, druską, vario sulfatą, Agar-Agar .

4. Paruoštą tirpalą gerai išmaišykite, uždenkite dangteliu (neužsukite) ir sterilizuokite 20 min. Sterilizuoti galima garpuodyje, arba mikrobangėje. Sterilizuojant mikrobangėje, ant didžiausio galingumo reikia pasiekti tirpalo virimą, vėliau, nustatyti mažiausią galingumą ir taip palaikant temperatūrą virti dar 20 min, stebėti.

5. Tarp dviejų šaukštų, susmulkinti antibiotikų tabletę ir užmerkti viename arbatiniame šaukštelyje spirito (antibiotikų sterilizacija).

6. Atvėsus tirpalui iki ~60°C supilti antibiotikus ir išmaišyti (lengvai suplakant).

7. Paruoštą tirpalą, kol nesustingo Agar-Agar, supilstyti į Petri lėkštutes ir lesti atvėsti iki kambario temperatūros.

VĖLIAU BUS PAPILDYTA…